药膳两用山野菜-长白楤木皂苷活性单体的分离鉴定及其指纹图谱的研究

楤木属植物皂苷具有强壮、镇痛、提高耐缺氧能力、抗炎、强心、降血脂、降血糖、抗癌等活性，是非常重要的生物活性成分，然而其组成、结构及分布极其复杂，活性与结构之间存在明显的构效关系。本项目拟从该属草本亚属药膳两用山野菜-长白楤木中分离和鉴定具有细胞毒活性和自由基清除活性的皂苷活性单体，在此基础上，开发建立长白楤木的高效液相指纹图谱和皂苷活性单体含量同时测定的方法，分析不同产地、不同采收期、不同生长年限的长白楤木嫩芽、叶、根样品的皂苷成分和含量变化差异。旨在探明长白楤木皂苷活性成分的结构特点、构效关系、分布和变化规律，进而阐明其活性作用的物质基础。并对药膳两用资源长白楤木的质量进行有效控制，加速其深度利用和规范化生产。

长白楤木（Aralia continentalis）是自然分布于吉林省长白山山脉及东北、华北部分地区的一种食、药兼优的经济植物，活性成分研究滞后，限制了其在药品及食品领域的深加工利用。本项目从长白楤木总皂苷的提取纯化入手，研究和确定了总皂苷提取和树脂纯化的工艺参数；采用硅胶柱层析法、凝胶柱层析法、制备液相法对总皂苷中皂苷单体进行了分离，获得7种皂苷单体，经NMR波谱法鉴定结构为皂苷单体1（楤木芽皂苷A，Congmuyanoside A)、皂苷单体2（楤木叶皂苷A，Congmuyenoside A)、皂苷单体3（楤木叶皂苷B， Congmuyenoside B)、皂苷单体4（楤木芽皂苷C，Congmuyanoside C)、皂苷单体5{3-O-[β-D-glucopyranosyl(1→2)-β-D-glucopyranosyl]hederagenin}、皂苷单体6{3-O-[β-D-glucopyranosyl(1→3)-α-L-arabinopyranosyl-echinocystic acid}、皂苷单体7（glucocaulophyllogenin）；其中皂苷单体4和6具有细胞毒活性，7种皂苷单体清除DPPH自由基活性弱，但7种皂苷单体均具有一定的α-葡萄糖苷酶抑制活性，其中皂苷单体1、2、4、5活性更强，提示具有一定的降血糖活性。在此基础上，建立了长白楤木总皂苷部位的高效液相指纹图谱和薄层色谱分析法，其中高效液相分析条件为agilent Zorbax SB-C18（4.6mm×250mm,5μm）色谱柱，乙腈-水梯度洗脱（体积比10：90～90：10），流速0.8mL/min，柱温20℃，检测波长206nm；薄层层析条件为氯仿：乙酸乙酯：甲醇：甲酸（80：10：30：1）为展开剂，硅胶254薄层板，10%硫酸乙醇溶液为显色剂，110℃烘烤3至5min；通过“中药指纹图谱计算机辅助相似度软件”，对来自6个地区10个不同采集地的长白楤木叶样品进行相似度计算结果表明，叶整体相似度较高，根、芽样品与叶样品相似度计算结果表明，芽样品与叶样品皂苷组成接近，而根样品皂苷组成与叶差异较大。项目研究结果为阐明长白楤木活性作用的物质基础，对其质量进行有效控制，加速其在食品与药品领域的深度开发利用提供了理论基础。