血管紧张素转化酶II阳性新型肺干细胞的来源和分化的研究

肺干细胞在肺疾病损伤的修复和防止肺纤维化的发生中起着重要作用，它们的来源和特异性细胞表面标记至今不清，难以分离和纯化，给临床应用造成很大的障碍。血管紧张素转化酶II阳性（ACE2+）干细胞是从SARS发病机理研究中发现的新型肺干细胞，目前尚不知它们的来源和在肺内的分化。本项目拟分离绿色荧光蛋白转基因鼠的骨髓或外周血 ACE2+ 细胞及肺ACE2+干细胞，与去除了ACE2+细胞的骨髓细胞混合移植建立嵌合鼠模型，进行肺ACE2+干细胞的来源 、归巢和肺内分化的研究，同时也进行骨髓或外周血ACE2+细胞表型特征的研究，以明确肺ACE2+干细胞的来源，证明ACE2是能分化成肺组织上皮细胞的骨髓或外周血干细胞的特异性细胞表面标记，为分离、纯化和大量制备肺干细胞进行肺疾病的临床治疗提供可靠的方法。

本课题的目的在于探讨肺血管紧张素转化酶II阳性（ACE2+）干细胞的来源 、归巢和肺内分化及骨髓或外周血ACE2+细胞的表型特征。我们用绿色荧光蛋白转基因鼠的骨髓或外周血 ACE2+ 细胞及肺ACE2+干细胞，与去除了ACE2+细胞的骨髓细胞混合移植建立嵌合鼠模型，分析肺ACE2+干细胞的来源 、归巢和肺内的分化。我们发现肺ACE2+干细胞确实是来源于骨髓或外周血的ACE2+细胞，骨髓或外周血ACE2+细胞及肺ACE2+干细胞能归巢到肺，经免疫组化检测,肺ACE2+干细胞能分化成Surfactant-C+II型肺泡上皮细胞，而骨髓或外周血ACE2+细胞则分化为F4/80+巨噬细胞。流式细胞仪的分析表明，人外周血 ACE2+细胞是CD14+的单核细胞表型，尽管其表达CD34mRNA,但不能被CD34抗体Qben10检测，在IL-4和GM-CSF诱导下能分化为DC-SIGN+树突状细胞（DCs）。.本课题还研究了外周血ACE2+细胞诱导分化的DCs在艾滋病毒（HIV）感染后导致凋亡的机制。通过将诱导分化的DC-SIGN+DCs暴露于重组的HIV gp120蛋白，我们发现gp120能通过促凋亡蛋白ASK-1的过度表达导致DCs过多凋亡，从而揭示了一个以前未知的HIV患者发生DCs减少和免疫抑制的机制。