PMT4在隐球菌生物膜的形成及其耐药中的作用

PMT4编码甘露糖基转移酶在内质网中催化甘露糖基O-糖基化反应，在隐球菌分泌功能和膜蛋白的功能及定位上起重要作用。隐球菌生物膜可明显降低隐球菌抗真菌药物的敏感性甚至产生耐药。隐球菌生物膜的形成和耐药与其分泌功能相关。我们前期研究主要集中在隐球菌荚膜和毒性因子及隐球菌生物膜的构建。本研究拟采用新生隐球菌MATα型野生株，并采用同源重组突变技术敲除PMT4基因构建PMT4突变株，以RT-PCR检测突变株和野生株的mRNA水平。聚苯乙烯96孔板培养法建立体外模型。用Vit k3(menadion)增强的四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定隐球菌生物膜代谢活性以及各变异株生物膜代谢活性的变化。采用共聚集显微镜对各变异株生物膜的结构。. 通过本研究可以进一步了解新生隐球菌的致病机制和耐药机制，明确隐球菌生物膜在致病和耐药方面的关键作用，并深入了解其遗传学机理。这一研究也有可能提供抗真菌药物的新靶点。