嗜热脂肪芽孢杆菌精氨酰tRNA合成酶基因的克隆

参照31种不同来源的精氨酰-tRNA合成酶（ArgRS）的同源序列，主要根据枯草杆菌和大肠杆菌ArgRS，在保守区域设计了5个引物，利用PCR方法从噬热脂肪芽孢杆菌染色体DNA中分别扩增出三个ArgRS基因argS部分编码区，经DNA序列分析及氨基酸的同源性比较，发现从中推导的氨基酸序列与枯草杆菌ArgRS有90%的同源性。再根据枯草杆菌ArgRS的氨基酸序列设计了N-端和C-端引物，与由已知序列合成的引物组合，用PCR方法成功地扩增出了编码区的两端序列。根据这些序列设计编码区两端的引物，用Pfu扩增并克隆了该细菌argS的结构基因。从中推导的氨基酸序列与枯草杆菌ArgRS有84%的同源性。