甲基汞致脑发育损伤及PKC和CaN介导的细胞周期负向调控

本项目研究甲基汞致发育阶段脑神经元损伤以及PKC和CaN介导的细胞周期负向调控，建立甲基汞致脑发育损伤动物模型，采用流式细胞仪检测不同发育阶段脑神经元细胞周期和细胞凋亡，采用原位杂交法和RT-PCR检测p21Waf1/Cip1、PKC及 CaN mRNA表达水平，采用Western blot或免疫组织化学法测定p21Waf1/Cip1、PKC及 CaN蛋白表达水平，采用免疫沉淀法同步测定脑神经元PKC亚类的选择性激活及CDKs、Cyclin活性的改变，采用激光共聚焦扫描显微镜测定细胞内钙离子浓度，采用SDS-PAGE和分光光度法测定CaN的含量及活性。探讨甲基汞致神经元细胞周期阻滞和脑发育损伤的分子机制。本项目有助于揭示甲基汞与胎儿和儿童神经毒作用易感性的关系，为长期接触低剂量甲基汞所致胎儿和儿童脑发育损伤防治提供依据，研究具有重要的理论和现实意义。