从“阳生阴长”探讨回阳生肌散对慢性皮肤溃疡愈合血管形成相关调控因子的作用机制

回阳生肌散是我院治疗慢性皮肤溃疡传统中医外用制剂，临床疗效卓著，但相关药理机制尚未阐明。本研究以中医阴阳互根理论为依据，从"阳生阴长"理论出发，探讨慢性皮肤溃疡阳衰阴亏病机和回阳生肌散的回阳以生肌、祛瘀以生新的药理机制。本研究采用糖尿病大鼠叠加外伤及外伤叠加复合因素所致两种皮肤久溃不愈（阴证疮疡）大鼠模型，以溃疡愈合的早期环节- - 血管形成为切入点，利用现代医学及分子生物学技术，动态观察回阳生肌散对皮肤溃疡区肉芽组织血管形成的影响，揭示该方促进血管形成的物质基础及相关分子机制。同时采用拆方分治的方法，观察全方及温阳益气、活血通络拆方对创面肉芽组织血管形成的作用环节和靶点，探讨温阳益气启动血管形成、活血通络促进血管形成的分子机制，从而丰富并阐释"阳生阴长"理论的科学内涵。本研究将为中医外科治疗慢性皮肤溃疡提供辨证论治的理论基础和新的治疗思路，为回阳生肌散的应用提供科学依据。

（1）本研究以“腹腔注射链脲佐菌素（STZ）—激素干预—皮肤缺损—塑料环埋置”方法制备糖尿病慢性皮肤溃疡动物模型和采用激素干预-皮肤缺损-细菌感染复合因素叠加法制备慢性皮肤溃疡大鼠模型。模型组动物阳虚症状明显,创面损伤程度较重,创面愈合时间明显延长,创面表现与中医临证“阴证疮疡”相接近,符合实验需要。（2）回阳生肌膏可以有效促进糖尿病慢性皮肤溃疡大鼠创面的愈合，温阳益气拆方在愈合早期作用较明显，活血通络拆方则在愈合中后期效果较好。回阳生肌膏对慢性皮肤回阳生肌膏及其温阳益气拆方、活血通络拆方均能促进慢性皮肤溃疡大鼠创面愈合,且全方的功效优于温阳益气拆方和活血生肌拆方。（3)给药3d、给药7d、给药14d模型组大鼠血清及创面新生肉芽组织的VEGF、VEGFR-2、eNOS含量低于正常对照组（P<0.05），全方组大鼠血清及创面新生肉芽组织的VEGF、VEGFR-2、eNOS含量高于模型组(P<0.05)。回阳生肌膏能通过提高创面局部VEGF、VEGFR-2、eNOS表达水平，促进肉芽生长和毛细血管新生，从而促进创面愈合，验证了“回阳生肌”学术理论。给药3d、7d，温阳组大鼠血清及创面新生肉芽组织的VEGF、VEGFR-2、eNOS含量高于活血组(P<0.05)。给药14d，活血组大鼠血清及创面新生肉芽组织的VEGF、VEGFR-2、eNOS含量高于温阳组(P<0.05)，提示温阳益气和活血生肌两拆方组在创伤愈合不同阶段发挥了不同作用，也验证了此“阳生阴长”、“回阳生肌”的理论。（4）实验前各组动物注射L-NAME抑制剂，屏蔽NOS活性，给药7d后，VEGFR2 mRNA含量表达正常组与温阳益气组比有统计学意义（P<0.05）；CD34、VEGF含量各组之间无统计学差异。