miR-30c对胃癌EGFR信号通路的调控作用及其机制研究

抗EGFR药物治疗胃癌的总体疗效欠佳，其个体化用药是亟待解决的临床问题。microRNA是细胞内信号转导的重要调节因素，以EGFR信号通路的多个蛋白为靶点且在肿瘤细胞中异常表达的特定miRNA有望成为抗EGFR治疗的潜在预测指标。现有文献显示miR-30c在膀胱癌和恶性间皮瘤中表达异常，在卵巢癌耐药细胞中显著下调,可作为乳腺癌患者三苯氧胺治疗的独立预测因子。我们的研究发现miR-30c在胃癌组织和细胞中表达较高，其预测靶点涉及SOS1、KRAS等多个EGFR信号蛋白。因而本项目拟通过体内外实验研究miR-30c高或低表达对胃癌细胞SOS1/KRAS蛋白表达和RAS-ERK信号的调控作用及其对胃癌细胞抗EGFR药物敏感性的影响，并研究胃癌患者miR-30c的表达和意义，为胃癌患者抗EGFR药物的个体化治疗提供新的思路和方法。

抗EGFR药物在晚期胃癌患者的总体疗效欠佳，其个体化用药是亟待解决的临床问题。microRNAs是细胞信号转导过程中重要的调控因子。对EGFR信号通路具有调控作用并且在肿瘤细胞中差异表达的特定miRNA有望成为抗EGFR治疗的潜在靶点和疗效预测因子。结合文献回顾和我们的前期工作，本项目提出: miR-30c通过调控SOS1/KRAS的表达，参与调控EGFR信号转导过程，并影响胃癌细胞对抗EGFR药物的敏感性，而且在胃癌患者中存在差异表达。本研究将有助于阐明胃癌细胞EGFR信号转导异常的调控机制，为胃癌的个体化靶向治疗提供新的思路和方法。.本项目首先构建荧光素酶报告基因研究miR-30c对SOS1/KRAS的表达调控，结果表明miR-30c能够调控K-RAS的表达。通过慢病毒系统构建miR-30c稳定转染细胞株SNC-1-30c，并检测EGFR信号通路相关蛋白的表达，结果表明miR-30c能够靶向调控EGFR信号通路的表达。.在体外模型中观察miR-30c对胃癌抗EGFR药物的敏感性的影响以及对细胞增殖、凋亡、细胞周期以及细胞运动和迁移的影响，结果显示miR-30c稳定转染细胞对吉非替尼和西妥西单抗敏感性显著增加，并且抑制细胞增殖, 延长G1期，增加凋亡，降低细胞运动和侵袭。.在体内裸鼠成瘤模型中研究miR-30c对肿瘤生长的影响，结果显示miR-30c抑制肿瘤的生长，HE染色显示肿瘤组织CD31、Ki67和nm23表达降低而Caspase 3表达增强。.本研究检测胃癌组织和正常胃粘膜组织中miR-30c的表达水平，结果显示， miR-30c在胃癌中表达显著下调，并且其低表达与不良预后有关，是胃癌独立的预后危险因素。此外，研究进一步探索了胃癌组织中miR-30c的表达下调可能是由于启动子DNA甲基化所致，为后续的机制研究奠定了实验基础。.目前，本项目按照预定计划完成主要实验内容。基于以上研究结果正在进行数据分析和论文撰写。