利用基因捕获技术在2.2.15细胞中搜寻对HBV转录、复制起调控作用的基因及其作用机理解析
基本信息
结项摘要
PU21是一种能够随机插入并整合在人类细胞染色体基因中的捕获载体，它能使被整合的基因失活。2.2.15肝癌细胞系能稳定地复制、表达HBV的各种基因产物，利用这种捕获载体随机整合到2.2.15肝癌细胞的染色体基因中，通过抗生素的筛选，形成一个个基因失活了的细胞单克隆。分别检测这些单克隆细胞株的HBs、HBe抗原的表达量的变化，筛选得到其中有显著变化的单克隆细胞株。通过5'RACE 、Southern、PCR、DNA克隆、测序等分子生物学方法，证明单克隆细胞株中被捕获的是什么基因。也就是通过失活某基因，检测HBV的表达发生变化，从而证明该基因与HBV转录、复制有关。利用该单克隆细胞株，可以容易地分析被捕获的基因调节HBV的作用机制。本方法能为发现对HBV的转录、复制起调控作用的基因及其功能研究提供新的途径。
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项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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