利用基因捕获技术在2.2.15细胞中搜寻对HBV转录、复制起调控作用的基因及其作用机理解析

基本信息
批准号:30771924
项目类别:面上项目
资助金额:33.00
负责人:汤华
学科分类:
依托单位:重庆医科大学
批准年份:2007
结题年份:2010
起止时间:2008-01-01 - 2010-12-31
项目状态: 已结题
项目参与者:唐任宽,蔡雪飞,刘湘,李毅,陈婧
关键词:
HBV2215肝癌细胞系。捕获载体
结项摘要

PU21是一种能够随机插入并整合在人类细胞染色体基因中的捕获载体,它能使被整合的基因失活。2.2.15肝癌细胞系能稳定地复制、表达HBV的各种基因产物,利用这种捕获载体随机整合到2.2.15肝癌细胞的染色体基因中,通过抗生素的筛选,形成一个个基因失活了的细胞单克隆。分别检测这些单克隆细胞株的HBs、HBe抗原的表达量的变化,筛选得到其中有显著变化的单克隆细胞株。通过5'RACE 、Southern、PCR、DNA克隆、测序等分子生物学方法,证明单克隆细胞株中被捕获的是什么基因。也就是通过失活某基因,检测HBV的表达发生变化,从而证明该基因与HBV转录、复制有关。利用该单克隆细胞株,可以容易地分析被捕获的基因调节HBV的作用机制。本方法能为发现对HBV的转录、复制起调控作用的基因及其功能研究提供新的途径。

项目摘要

项目成果
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数据更新时间:2023-05-31

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