白血病细胞中Wnt5a介导非经典Wnt信号发挥抑癌因子作用的机制研究

近来研究表明Wnt5a启动子甲基化导致其在白血病中普遍表达缺失，Wnt5a在白血病中是一种抑癌因子。我们前期研究发现：Wnt5a在治疗缓解的白血病病例中表达恢复，在体外可抑制白血病细胞株K562增殖并诱导其分化，该作用与启动了Wnt5a/Ca2+非经典通路有关。本项目拟在已有工作基础上，从Wnt信号的起始点- - Wnt5a配体与Ror2受体为切入点，研究Wnt5a/Ror2/Ca2+非经典通路在白血病细胞株、免疫缺陷鼠移植瘤和移植性白血病细胞中是否可直接或间接抑制经典Wnt信号转导？通过研究验证我们的假设：Wnt5a通过Wnt5a/Ror2/Ca2+非经典信号通路,直接或间接抑制经典Wnt信号转导，发挥抑癌因子的作用，缺乏该抑癌因子是白血病发生的分子机制之一。研究结果有利于加深对经典和非经典Wnt信号通路在白血病发生中的作用和相互关系的认识，为白血病的诊断和治疗提供新的治疗靶点和预后判断指标

已有研究表明Wnt5a在白血病中是一种抑癌因子。我们前期的研究显示其启动子甲基化而致在白血病中普遍表达降低；Wnt5a可以抑制白血病细胞株K562的增殖并诱导其分化，但其机制不明。本研究从Wnt5a与其受体Ror2为切入点，研究结果表明：1)Wnt5a上调了Ror2在K562细胞中表达；Ror2与Wnt5a相互作用抑制了Wnt5a与Frz4、LRP5之间的结合，最终激活了Wnt5a/Ror2非经典Wnt信号通路；2)当使用抗体封闭Ror2受体后，Wnt5a主要介导Frz4/LRP5受体途径，并促进细胞增殖，此时Wnt5a可能主要发挥癌基因的作用；3) Wnt5a/Ror2非经典通路抑制了K562细胞移植瘤的增殖，其机制与Wnt5a抑制经典Wnt信号转导有关。并且我们的扩展研究表明4）γ-catenin在CML（K562和KU812细胞）中与β-catenin一样表现出癌蛋白的功能，其作用与通过GSK3β调节β-catenin有关。研究结果进一步加深了Wnt5a在白血病中发挥抑癌因子作用机制的认识，并为白血病的诊断和治疗提供新靶标奠定了基础。