Wnt5a及其非经典Wnt信号通路在鼻咽癌转移中的作用及机制研究

以Wnt5a为代表的非经典Wnt信号通路在肿瘤转移中发挥了重要作用, 但导致鼻咽癌转移的分子机制未明。通过研读文献并结合课题组的前期工作，我们提出如下学术思路："Wnt5a与鼻咽癌转移密切相关，可能通过非经典Wnt信号通路，即Wnt5a/Caveolin-1/PKC途径介导鼻咽癌细胞发生上皮间质转化，促进肿瘤的侵袭转移"。本项目拟采用裸鼠鼻咽癌自发转移模型，结合临床样本检测，运用基因芯片、三维培养、免疫共沉淀、免疫荧光染色联合激光共聚焦技术和病毒载体介导的基因转染与干扰等方法，探讨Wnt5a及其非经典信号通路对鼻咽癌转移的生物学特性的影响，旨在寻找新的转移标志物和阐明新的分子机制。本项目所揭示的Wnt5a/Caveolin-1/PKC这一新的信号途径，不仅丰富了非经典Wnt信号通路的内容，也将为鼻咽癌的分子靶向治疗提供理论依据，对判断预后和提高鼻咽癌转移患者的生存率具有重要的临床意义。

鼻咽癌是我国华南地区及东南亚常见的一种恶性肿瘤，治疗主要以放疗为主，仍有30%以上的鼻咽癌患者会产生远处转移。但导致鼻咽癌转移的具体机制未明。WNT5A是一类含丝氨酸丰富的分泌性糖蛋白，主要参与非经典的WNT信号通路。研究表明WNT5A与肿瘤发生发展密切相关。但WNT5A在鼻咽癌转移中的作用及机制尚不清楚。我们首先通过在细胞水平和动物水平采用全基因组高通量芯片扫描找到调控鼻咽癌转移的特征性基因WNT5A，并在细胞水平、动物整体水平以及临床标本三个不同层次探讨WNT5A与鼻咽癌转移的关系，同时采用病毒转染高表达或沉默WNT5A以及PKC抑制剂和激活剂进行机制探讨。结果显示WNT5A 通过激活PKC通路，调控Snail、E-cadherin等蛋白的表达，促进鼻咽癌细胞发生上皮间质转化，从而导致肿瘤的转移；PKC的激活剂PMA以及抑制剂GF-10923X和Gö 6983也能通过调节Snail和E-cadherin的表达，影响上皮间质转化以及鼻咽癌细胞的迁移能力；WNT5A与PKC之间存在正反馈调控。因此WNT5A和PKC均为鼻咽癌转移的重要信号分子，可能成为防治鼻咽癌转移的潜在的靶点，对肿瘤转移药物的研发和提高转移患者的生存率具有重要的意义。此外，我们进行全基因组芯片扫描时还发现另外与鼻咽癌转移相关的关键基因Serglycin，深入研究发现：糖基化Serglycin通过自分泌和旁分泌途径调控鼻咽癌转移，在临床样本中Serglycin在肝转移样本中表达显著增加，因此Serglycin可作为鼻咽癌患者转移生存率和带瘤生存率预后的独立指标。除了研究WNT5A在鼻咽癌转移的作用，还发现WNT5A的表达水平在肾癌细胞中明显增高，且与肾癌的细胞分化程度、组织类型及预后密切相关，提示WNT5A可能也参与了肾癌的发生发展过程。由于肿瘤发生和As发病存在某些共同生物学机制，我们还拓展了新的相关的研究领域：基于脂质代谢是肿瘤和As的共同生物学机制，我们发现WNT5A还参与As的发病，并且通过调控胆固醇转运关键蛋白ABCA1和Caveolin-1, 抑制荷脂细胞中胆固醇蓄积，发挥抗动脉粥样硬化的作用。该项目的成果以科研论文和科研总结的形式提供，已经在《Cancer Research》、《Advance in Cancer Research》等国内外核心期刊发表，2篇论文正在修回中。