基于补骨脂与其他药味相互作用的青娥方配伍机制研究

Compatibility theory is the key problem for the interpretation the function mechanism of traditional Chinese compound preparations. Most herb-herb interactions are mediated by pharmacodynamic and/or pharmacokinetic mechanisms. Qing'e Fomula is a famous compound preparation which consists of four ingredients, Eucommiae Cortex (Duzhong, stir-baked with salt), Psoraleae Fructus (stir-baked with salt), Juglandis Semen (stir-baked) and Bulbus Allii(steamed). Previously studies show that Qing'e Fomula has estrogenic activities, but its compatibility synergia mechanism is still unclear. In this study，compatibility mechanism studies of Qing'e Fomula based on herb-herb interaction between Posoraleae Fructus and other ingredients will be carried on. In Vivo and in vitro studies on the pharmacodynamic and pharmacokinetic interactions between the four herbs will be investigated. Pharmacokinetics and metabonomics method will be used to find and identify the related biological markers, pathological indicators and determinate the biochemical.The research results is prospected to provide theoretical basis for explaination of the compatibility mechanism of Qing'E formula on the estrogenic activity, and to have important guiding significance for the research of the compatibility mechanism of other traditional Chinese compound preparations.

配伍作为复方中药物的核心关系，是复方发挥疗效的关键，其科学性是阐明方剂作用机制的基础。中药复方配伍机制研究长期以来主要围绕"化学成分-药效学-药动学"3个角度分别展开。补肾经方青娥方由杜仲（盐炒）、补骨脂（盐炒）、核桃仁（炒）、大蒜（蒸熟）四味药组成，具有雌激素样作用，且以全方效果最佳，但其配伍增效机制尚不明确。本研究拟以青娥方为研究对象，从补骨脂入手，围绕青娥方的雌激素样作用开展补骨脂与各组方药味配伍前后的药效学比较研究；同时研究青娥方全方及各配伍药物组合物中补骨脂相关活性成分的吸收、分布、代谢的变化；采用代谢组学、药代动力学方法发现表征配伍前后药效学变化的生物标示物和化学标示物，从药效学和药动学相互作用角度阐明青娥方的配伍机制。研究结果可为青娥方配伍机制的阐明提供理论依据，也可为其它中药复方配伍机制研究提供借鉴。

配伍作为复方中药物的核心关系，是复方发挥疗效的关键，其科学性是阐明方剂作用机制的基础。中药复方在体内，各药味之间可发生药效学和药动学相互作用，从而影响疗效。青娥丸首载于宋代的《太平惠民和剂局方》，以杜仲（盐炒）为君、补骨脂（盐炒）为臣、佐以核桃仁（炒）、并以大蒜（蒸）为使，共奏补肾强腰之功。在中药复方配伍理论的指导下，本研究以青娥方为研究对象，从补骨脂入手，围绕青娥方的雌激素样作用开展补骨脂与各组方药味配伍前后的药效学比较研究；同时研究青娥方全方及各配伍药物组合物中补骨脂相关活性成分的吸收、分布、代谢的变化，从药效学和药动学相互作用两个方面阐明青娥方的配伍机制。.从药效学角度，采用整体动物模型（未成熟小鼠、去势大鼠）和体外模型（MCF-7细胞增殖实验、稳定转染ERα-ERE、ERβ-ERE质粒的HEK293 细胞荧光素酶报告基因表达实验）探讨青娥方雌激素样作用的配伍规律。结果表明，青娥方中君药杜仲、臣药补骨脂在方剂中发挥雌激素样作用；当君臣药配伍使用，两药具有协同作用；当两药分别配伍佐药核桃仁、使药大蒜时它们的雌激素样作用增强；在青娥方各拆方组中尤以青娥方复方效果最佳，从药效学角度揭示了青娥方君臣佐使的配伍规律，验证了中医复方整体用药的科学性。.从药动学角度，以补骨脂的8个主要活性成分补骨脂素、新补骨脂异黄酮等为指标，对补骨脂的血浆药代动力学、组织分布、体内化学成分进行研究，并探讨青娥方中其他药物的配伍对补骨脂药代动力学行为的影响，并用Caco-2细胞模型研究补骨脂及青娥方拆方配伍组合物的吸收转运机制。在青娥方全方中，补骨脂的指标性成分均表现出体内血药浓度增加、清除率下降的特点，药物的配伍增加了补骨脂活性成分在体内的作用程度和时间。该结论从药动学角度，部分解释了青娥方全方的雌激素样作用最强的原因，也从药代动力学配伍的角度揭示青娥方复方配伍的内涵。