AnnexinsA1/A2的膜聚集对肺血管重建中PASMCs表型转换的调控作用和机制研究

对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）表型转换分子机制的研究已经成为肺血管重建（PVSR）防治的新突破点。目前研究报道和我们前期研究发现多条信号通路与之有关，寻找链接多条信号通路作用的枢纽蛋白是深入研究的关键点。鉴于AnnexinsA1/A2通过膜聚集调节多种细胞的蛋白运输、细胞增殖和迁移并与这些信号通路关联；本项目提出"低氧等刺激→ANNX1/2膜聚集→多条信号通路的共同枢纽→调节表型与骨架相关蛋白→表型转换→血管重建"假说，拟用基因转染和siRNA等技术，研究ANNX1/2膜聚集与PASMCs表型转换时表型蛋白合成运输活化，以及细胞增殖迁移凋亡的关系；与PKG、Akt、MAPK/ERK等途径关键蛋白表达、跨膜转运、运输的关系；明确annexins A1/A2的表达与蛋白膜聚集在肺血管重建中是否有关键性调节作用，研究结果对进一步揭示PVSR分子机制有重要意义，也为PVSR防治提供了新靶点。

对肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）表型转换分子机制的研究已经成为肺血管重建（PVSR）防治的新突破点。目前研究报道和我们前期研究发现多条信号通路与之有关，寻找链接多条信号通路作用的枢纽蛋白是深入研究的关键点。鉴于AnnexinsA1/A2通过膜聚集调节多种细胞的蛋白运输、细胞增殖和迁移并与这些信号通路关联；本项目提出“低氧等刺激→ANNX1/2膜聚集→多条信号通路的共同枢纽→调节表型与骨架相关蛋白→表型转换→血管重建”假说。我们运用激光共聚焦、基因转染、沉默等技术取得下列研究成果：1.证实Annexins A1/A2的表达和蛋白膜聚集在NF-Kb、ERK1/2等多条重要信号通路调控PASMCs表型转换中的“枢纽”价值；2.证实PASMCs在低氧、肝肺综合征等病理条件下发生细胞骨架重构时，Annexins A1/A2的表达和蛋白膜聚集在细胞骨架重构存在调控作用；3.运用相关蛋白质互作软件对可能与anenxinA1/A2相互作用的蛋白进行筛选，发现并证实Paxillin是其中的一个重要的互作靶点，介导了Annexins A1/A2膜聚集对PASMCs表型转换、骨架重塑的调控作用；4. 证实anenxinA2作为一个关键蛋白，其膜聚集在细胞膜上的信号平台-脂筏介导的信号转导过程中发挥了关键性的作用，而脂筏的重要组成蛋白caveolin-1则可以抑制相关信号，进而抑制HPS大鼠血清诱导的PASMCs的增殖；5.研究结果还表明肝肺综合症大鼠血清通过miR-206/ ANXA2、 miR-9/ MYOCD通路影响肺动脉平滑肌细胞表型转换，在肝肺综合症肺血管重建中可能发挥了重要作用；6. 证实ANXA1活化后调节PMVECs骨架蛋白表达在肺微血管重构中的作用。7.通过对HPS动物模型进行改良，使模型死亡率由改良前的77.5%降低到42.5%；同时研究发现HPS的形成是一个先损伤再增殖的过程。上述研究系统的阐明Annexins A1/A2膜聚集调控PASMCs表型转换、骨架重塑在肺血管重建机制中的作用，从而为系列血管性疾病的防治提供新的思路和更优价值的治疗靶点。