基于HMGB1-TLR4信号轴探讨药对麻黄-杏仁配伍对支气管哮喘NETs的调控作用机制研究

Extracellular network capture is a new way of cell death. Neutrophil extracellular network (NETs) plays an important role in the development of bronchial asthma. We have found that the couplet medicines "Mahuang- Xingren" can inhibit the formation of NETs in asthma. The study aims to explore the mechanism of the couplet medicines in inhibiting the NETs formation of asthma, especially to study the role of HMGB1-TLR4 pathway in inhibiting the NETs formation of asthma. The research contents include the use of human derived neutrophils as a research object to detect the change rule of HMGB1-TLR4 pathway in the action of Chinese medicine. Then we further verify that HMGB1-TLR4 is involved in the inhibition of NETs by traditional Chinese medicine in transgenic mice. The study lays the foundation for the research of the role of HMGB1-TLR4 in the couplet medicines to inhibit NETs, providing a scientific basis for the prescription compatibility and enriching the material basis of Chinese medicine.

胞外诱捕网是近年来新发现的一种细胞死亡方式，中性粒细胞胞外诱捕网在支气管哮喘发展中发挥重要作用。我们在预实验发现药对麻黄-杏仁配伍能够抑制哮喘NETs形成。本课题旨在探讨麻黄-杏仁配伍抑制哮喘NETs形成的作用机制，特别是研究HMGB1-TLR4通路在药对抑制哮喘NETs形成过程中的作用。研究内容包括利用人源性的中性粒细胞作为研究对象，检测HMGB1-TLR4通路在中药对发挥作用中的变化规律；然后通过基因敲除小鼠模型，进一步验证HMGB1-TLR4参与中药对NETs的抑制作用。本研究的实施为明确HMGB1-TLR4信号轴在药对“麻黄-杏仁”抑制NETs中的作用及其机制的研究奠定基础，为方剂配伍治疗提供科学依据，丰富祖国医学物质基础。

哮喘是全球范围内严重危胁公众健康的一种慢性呼吸道炎症性疾病。吸入性糖皮质激素是临床治疗哮喘的首选药物，但是不能完全消除患者气道高反应性。传统方剂麻黄汤、麻杏石甘汤、三拗汤等在治疗支气管哮喘炎症方面具有显著功效，这几味方剂中均含有麻黄-杏仁配伍，本研究从该药对配伍着手，深入探讨其抗喘机制，发挥中医药治疗哮喘的优势。本课题提出如下假说：药对“麻黄-杏仁”通过作用于信号轴HMGB1-TLR4 抑制支气管哮喘NETs 作用，从而发挥抗炎作用。研究内容如下：1）HMGB1在药对麻黄-杏仁抑制哮喘患儿外周血NETs过程中的作用研究。2）TLR4在药对麻黄-杏仁抑制哮喘患儿外周血NETs形成中的作用研究。3）HMGB1-TLR4 信号轴在药对麻黄-杏仁抑制哮喘小鼠中性粒细胞胞外诱捕网中的作用。重要结果如下：文章1）Ephedra-Almond herbal pair inhibits formation of NETs by inhibiting the HMGB1/TLR4 signaling pathway. 2）Riparin II potentials the effect of ephedrine on inflammation and remodelling in the airway of rats suffering from asthma by regulating transforming growth factor-β/Smad3 signalling pathway.本研究不仅阐明了麻黄-杏仁中药对通过抑制HMGB1/TLR4信号通路抑制中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）的形成，而且进一步揭示了中药提取物吴茱萸碱可减轻哮喘肺组织炎症与气道重塑，临床上可以用于治疗哮喘，以及瑞帕林II通过调节转化生长因子β/Smad3信号通路，探讨麻黄碱对哮喘大鼠气道炎症和重塑的影响。