Find-me和Eat-me信号在NOD.H-2h4 小鼠自身免疫甲状腺炎发病机制中的作用

Autoimmune thyroditis(AIT) is a common autoimmune endocrine disease which is closely related to genetic and environmental factors.Little is known about the role of iodine induced thyrocyte apoptosis and damage in AIT.Therefore,we hypothesized" excessive iodine intake→apoptosis of thyrocyte→expression of Find-Me and Eat-Me signals→clearance deficiency of apoptotic cells→lead to AIT". In order to vertify our hypothesis,we will cut from different time point,seeking evidence of apoptotic cells leading to the initiation of AIT.Identify the clearance dificiency of macrophage in AIT susceptible mice. Using methods such as molecular biolgy、immunology explore the potential role of Find-me signals and Eat-me signals in the process of the clearance of apoptotic cells.There is a great significance to elucidate the mechanism of apoptotic cell inducing the initiation of AIT Which may Provide theoretical basises for prevention AIT from the source.

自身免疫甲状腺炎（AIT）是内分泌系统的最常见疾病之一。环境因素和遗传因素都与本病密切相关，碘致甲状腺细胞凋亡、损伤在AIT发病机制中的作用仍知之甚少。为此我们提出假说"碘摄入量增加→甲状腺细胞凋亡→Find-Me和Eat-Me信号产物表达→凋亡坏死的细胞清除不利→诱发甲状腺自身免疫发生"。为了验证这一假说，我们将从不同的时间点切入，寻求凋亡细胞致AIT发病的证据，明确AIT易感鼠存在巨噬细胞吞噬功能缺陷。通过分子生物学、免疫学等方法，从分子、细胞、组织以及动物整体水平等多方面探讨Find-Me信号和Eat-Me信号在巨噬细胞对凋亡细胞清除过程中的潜在作用及机制,对阐明凋亡细胞致AIT发病的机制具有重要意义，为从源头防治AIT提供理论依据。

自身免疫甲状腺炎（Autoimmune thyroiditis, AIT）是内分泌系统的常见疾病，碘摄入量是致病因素之一，但其始动过程一直不明确。本研究提出了“碘摄入量增加→甲状腺细胞凋亡和损伤→Find-me 和Eat-me 信号产物表达→凋亡坏死细胞清除不利→甲状腺自身免疫发生”的假说，拟阐明AIT的发病机制，为从根本上防治AIT提供理论依据。. 将NOD.H-2h4小鼠和BALB/c小鼠随机分入对照（CON）组和高碘（HI）组，建立AIT动物模型。 对Eat-me信号中PS进行检测：发现喂养8W和16W时HI组甲状腺PS高于CON组，并高于其它时间点，说明AIT中PS增加。 对Find-me信号中S1P及其上游Sphk1、Sphk2进行检测：发现SAT组甲状腺SphK1、甲状腺及血清S1P、脾脏S1PR1表达量均高于CON组。结论：SphK1、S1P、S1PR1参与AIT的发生发展。对Find-me 信号中LPC及其上游cPLA2、iPLA2进行检测，发现三者在两组间表达无差异。说明LPC、cPLA2及iPLA2不参与AIT的发生发展。. 培养CD4+T细胞，分别给予S1P刺激、FTY720阻断，探讨S1P对STAT3的激活作用。发现S1P使P-Tyr705-STAT3和P-Ser727-STAT3水平增加，FTY720可阻断S1P对STAT3的激活作用，激活作用主要通过S1PR1受体实现。体内试验探讨S1P特异性阻断剂FTY720对AIT的预防及治疗作用：将NOD.H-2h4小鼠随机分为CON组，SAT组，PRE组，TRE组及FTY组，FTY720灌胃处理，检测各组AIT发生率、血清TgAb等。结果显示，PRE组和TRE组甲状腺炎发生率低于SAT组，PRE组血清TgAb始终低于SAT组，TRE组在14W及16W时血清TgAb低于SAT组。FTY720预防性及治疗性处置后，甲状腺炎评分降低，血清TgAb滴度降低，提示阻断S1P与S1PR1结合可减轻该种小鼠甲状腺内淋巴细胞浸润程度；FTY720主要通过阻断S1PR1起治疗作用。最后探讨了Find-me信号的作用机制，结果显示S1P是通过JAK-2、AKT-mTOR通路激活STAT3发挥效应。本研究阐明了细胞凋亡导致AIT的发病机制，为从源头上防治AIT提供了理论依据。