鸡转基因生物反应器实现输卵管特异高通量表达的策略研究

家禽转基因的成功与否主要取决于转基因方法的有效性、功能基因的选择及其表达调控。本研究从卵清蛋白等卵白蛋白基因的5'上游调控序列中寻找增强子等关键调控单元，经整合、重复、变异等手段，将其改造成具有输卵管特异性且高通量表达的人工优化启动子。通过卵清蛋白基因转录活化因子的鉴定，建立功能基因与调节基因双蛋白表达载体系统，使优化启动子活性进一步获得反式增强。继而运用上述创新性调控模式，构建包含"优化启动子-分泌信号肽序列-人干扰素基因-特异启动子-转录调控基因"构造的新型慢病毒载体，并对载体中影响基因转录、翻译与分泌的组件进行细胞水平上的序列筛选和配置优化。最终，引进国外慢病毒制备、鸡胚手术及术后培养等先进技术加以改进，建立慢病毒介导的高效率家禽转基因技术，获得分泌高浓度人干扰素的转基因鸡。从而解决家禽生物反应器中高通量表达调控手段缺乏的国际性难题，创建慢病毒介导法制备转基因家禽生物反应的技术体系。