携改良HBVpreS1基因的嗜肝性rAAV2的构建及应用研究

目前，肝病的基因治疗尚缺乏有效的靶向性载体。乙型肝炎病毒（HBV）具有天然嗜肝性，它的包装蛋白中的大蛋白N端1-119个氨基酸残基（aa）段(PreS1)位于HBV表面，是HBV与肝细胞结合的重要部分，是嗜肝性的分子基础。PreS1由HBVpreS1基因编码，它具有免疫原性，可诱导机体免疫反应并对肝细胞产生免疫性损害；重组腺相关病毒（rAAV2）是基因治疗的常用载体，具有免疫原性弱、无致病性和目的基因长期表达等优点。本课题用PCR法提取PreS1的编码基因片段HBVpreS1，并将该片段中编码抗原决定簇的基因作无免疫原性修改后定点整合入rAAV2包装基因（Cap）上，使修改后的基因片段在rAAV2转染过程中表达出新型PreS1并包装rAAV2，从而构建出既有嗜肝性又无HBV免疫原性，还保留rAAV2优点的可用于肝病靶向基因治疗的嗜肝性rAAV2。本研究将为肝病基因治疗提供理想的靶向性载体。