MicroRNAs靶向激活PAWR和WT1基因治疗膀胱癌及其作用机制的研究

膀胱癌是我国最常见的泌尿系统恶性肿瘤，尤其是浸润性或转移性膀胱癌，其有效治疗方法的探索极为重要。我们的合作者Li在2006年发现了小分子RNA 激活基因表达(RNAa)的现象，随后他们又发现microRNAs也能诱导RNAa现象。本研究小组在前期工作中已筛选到若干能激活PAWR和WT1基因表达的saRNAs，它们能有效抑制膀胱癌等肿瘤细胞的生长和活性。在此基础上，本项目将从已知人miRNAs数据库中筛选与这些saRNAs序列近似的miRNAs，评估其RNAa诱导能力，从中挑选出若干功能性miRNAs，并通过流式细胞术、动物实验等评估这些功能性miRNAs的膀胱癌治疗效果和应用前景；同时，利用染色质和RNA免疫共沉淀、RACE、生物信息学分析方法等，探讨miRNAs诱导RNAa的作用机制。本项目的开展将拓展我们对miRNAs功能的认识，为论证RNAa技术的普遍性和应用价值增添可靠的实验依据。

膀胱癌是我国最常见的泌尿系统恶性肿瘤，尤其是浸润性或转移性膀胱癌，其有效治疗方法的探索极为重要。我们的合作者Li 在2006 年发现了小分子RNA 激活基因表达(RNAa)的现象，随后他们又发现microRNAs 也能诱导RNAa 现象。本课题根据肿瘤抑制基因PAWR和WT1启动子区序列，从已知人miRNAs 数据库中筛选出序列相似度较高的miRNAs，评估其RNAa 诱导能力，从中挑选出功能性miRNAs，miR-PAWR和miR-WT1。流式细胞术、动物实验等进一步实验提示这些功能性miRNAs能有效抑制膀胱癌细胞的生长和活力，诱导细胞凋亡，而且能明显抑制裸鼠异位膀胱癌模型中肿瘤的生长。这些miRNAs在诱导靶基因激活的同时还引起启动子区组蛋白表观遗传学修饰的相应变化。本项目评估了这些功能性miRNAs对膀胱癌的治疗效果和应用前景，拓展了我们对miRNAs 功能的认识，为论证RNAa 技术的普遍性和应用价值增添了可靠的实验依据。