肌细胞增强因子MEF2D通过诱导EMT增强肝癌的侵袭转移能力

MEF2家族促进肝癌的发生。我们前期的研究表明，MEF2D促进肝癌的侵袭转移，但作用机理尚未阐明。序列分析显示EMT关键因子Twist1的启动子存在MEF2顺式作用元件。我们推测MEF2D通过激活Twist1的转录表达，促进肝癌细胞发生EMT，从而增强肝癌的侵袭转移能力。本项目拟采用分子生物学和细胞生物学技术，利用动物转移瘤模型，结合肝癌组织芯片的免疫组织化学检测，验证MEF2D通过诱导EMT过程增强肝癌的侵袭转移能力。我们希望揭示MEF2D在肝癌中显著表达的临床意义，阐明MEF2D促进肝癌侵袭转移的分子机制，为MEF2D成为预测肝癌发生侵袭转移的分子标记物提供理论依据。

肝细胞癌是一种侵袭能力强、致死率高的恶性肿瘤。但是，肝细胞癌发生的分子机制仍然未能完全阐明。肌细胞增强因子2D（MEF2D）是一个在多种类型的细胞中发挥作用的促存活因子，并且在白血病中可能扮演原癌基因的角色。然而，MEF2D在实体瘤中的作用未知。在本课题中，我们对MEF2D在肝细胞癌中的表达情况以及作用进行了研究。数据表明，MEF2D的表达量在肝细胞癌标本中明显上升，并且与病人的术后存活时间呈负相关关系。沉默MEF2D的表达能减弱肝癌细胞的侵袭和转移能力。MEF2D对肿瘤侵袭转移的促进作用与其对Twist转录的促进作用密切相关。此外我们还发现，MEF2D阳性的肝癌细胞的增殖快于MEF2D阴性的群体。沉默MEF2D的表达能削弱肿瘤细胞的增殖能力。反之，提高MEF2D的表达量可以加快肝癌细胞的扩增速度。动物实验进一步证实，沉默MEF2D的表达会大大削弱肝癌细胞系的成瘤能力。MEF2D表达量的下降会引起肿瘤细胞发生G2/M期阻滞。通过基因芯片技术和生物信息学分析，我们发现MEF2D能够通过结合RPRM, GADD45A, GADD45B 和CDKN1A的转录起始位点上游区域中的MEF2识别序列抑制这些G2/M期周期阻遏蛋白的转录，从而加快肝癌细胞的增殖速度。进一步的研究发现， miR-122能够负调控MEF2D的表达。肝癌细胞内miR-122的低表达或许能够解释MEF2D高表达的原因。上述发现的意义在于证明MEF2D在肝癌发生发展和侵袭转移中的作用。MEF2D有望成为肝癌治疗的潜在分子靶点。