嗜酸粒细胞性鼻息肉中CXCR5+CD8+常驻记忆型T细胞对局部IgE产生的调控与机制

Chronic rhinosinusitis with nasal polyps (CRSwNP) is a heterogeneous disease, local IgE production may be an inductive factor of eosinophilic inflammation in nasal polyps. However, the mechanism of high level local IgE production in eosinophilic CRSwNP is not clear. Similar to CD4+T follicular helper (Tfh) cells, CXCR5+CD8+tissue resident T (Trm) cells could induce proliferation and immunoglobulins production in B cells. Our unpublished data have discovered the existence of CXCR5+CD8+Trm cells in human nasal polyp tissues, however, the phenotype and function and their regulation local production of IgE of these CXCR5+CD8+Trm cells are unknown. In this project, we will take the advantage of the availability of surgical nasal polyp samples, we will isolate local CXCR5+CD8+Trm cells from both eosinophilic and non-eosinophilic CRSwNP and peripheral blood B cells by utilizing magnetic activated cell sorting. By coculture CXCR5+CD8+Trm cells and B cells and key molecule pathway blockage, IgE production are determined. This study will identify the regulating mechanism of local IgE production in B cells by CXCR5+CD8+Trm cells in eosinophilic CRSwNP and make us further understand the underlying pathomechanism between eosinophilic and non-eosinophilic CRSwNP.

鼻息肉是一种异质性疾病，黏膜组织局部IgE的产生可能是鼻息肉嗜酸粒细胞性炎症的诱发因素。然而，嗜酸粒细胞性鼻息肉中局部高浓度IgE产生机制尚不明确。研究显示，类似CD4+滤泡辅助性T(Tfh)细胞，CXCR5+CD8+常驻记忆型T细胞（Trm）可与B细胞相互接触发生作用，促进B细胞增殖及免疫球蛋白的产生。我们前期研究结果显示鼻息肉组织中存在CXCR5+CD8+Trm细胞，但这种细胞特征如何，是否能够调控鼻黏膜局部IgE的产生并不清楚。本课题将利用人体鼻息肉组织容易获取的优势，采取免疫磁珠分离不同类型鼻息肉组织CXCR5+CD8+Trm细胞与外周血B细胞，通过不同组织来源CXCR5+CD8+Trm细胞与B细胞共培养及关键分子通路阻断，检测B细胞IgE的产生。研究结果将有助于明确嗜酸粒细胞性鼻息肉中CXCR5+CD8+Trm细胞对局部B细胞IgE产生的调节作用与机制，进一步阐明鼻息肉发病机制。

本课题拟通过对比嗜酸和非嗜酸粒细胞性鼻息肉组织以及扁桃体和外周血中此类细胞进行对比，采用流式细胞分析技术、体外细胞共培养的技术探讨CXCR5+CD8+ Trm细胞的表型、特征以及对局部IgE产生的调控机制。我们发现，正常对照下鼻甲、嗜酸和非嗜酸粒细胞性 CRSwNP患者鼻息肉组织及扁桃体组织均存在CXCR5+CD8+Trm细胞，且该类细胞在嗜酸和非嗜酸粒细胞性 CRSwNP患者表达较正常下鼻甲中的表达增高。通过流式细胞学的胞内染色技术，我们发现CXCR5+CD8+Trm细胞中存在各TH亚群的分布，IFN-γ 、IL-4 、IL-13 、IL-5 、IL-17A、 IL-21、Bcl-6均在正常对照下鼻甲、嗜酸和非嗜酸粒细胞性 CRSwNP患者鼻息肉组织及扁桃体组织中的CXCR5+CD8+Trm表达，进一步证实我们之前的猜测，有意思的是，我们发现IL-4+CXCR5+CD8+TRM在嗜酸性粒细胞鼻息肉中明显增高，但是具体的功能，及调控，因为样本量的缘故需要后续试验进一步证实。此外，该项目资助了CIRP在鼻息肉中的表达及调控。投稿在ALLERGY杂志，于2021年3月份正式接收发表。该研究证实鼻息肉上皮细胞中高表达的CIRP通过上调MMPs及VEGF的表达参与鼻息肉水肿的形成，为鼻息肉的治疗寻求新的治疗靶点.