金黄色葡萄球菌粘附素ClfB底物结合机制研究

金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus, 简称金葡菌 ) 是临床中最常见的人畜共患病原菌。其日益严重的耐药性给人畜健康造成重大威胁。深入研究病原菌与宿主相互作用的分子机制，对于感染性疾病的预防和控制尤为重要。本课题组前期于国内外首次解析了金黄色葡萄球菌主要粘附素ClfB与底物Fg、CK10复合物的晶体结构，揭示了ClfB多底物结合的特性。本研究拟应用噬菌体展示技术系统筛选与ClfB结合的新的特异性底物，运用SPR和ITC等方法测定其与ClfB的亲和力，明确其结合动力学特性；同时通过与ClfB共结晶的复合物结构解析，可望较为全面的阐明ClfB与底物结合特征及其介导的金黄色葡萄球菌感染机制，揭示其在金葡菌粘附发生、发展中的重要作用，为临床上发展新的抗感染策略提供新的思路和理论依据。

金黄色葡萄球菌是一种重要的对人和动物均可造成危害的病原菌。金葡菌的致病过程涉及到很多细胞外和细胞壁的蛋白，ClfB是MSCRAMM表面蛋白之一，是能与纤维蛋白原结合的凝集因子，是鼻腔定殖的关键因子，然而ClfB与底物相互作用的机制还不清楚。在本研究中，我们首先解析了apo-ClfB的结构，然后解析了ClfB-Fgα和ClfB-CK10两个复合物的晶体结构，通过结构比较，我们发现与ClfB结合的基序GSSGXGXXG是一段保守的富含甘氨酸-丝氨酸的序列，而且在其它人的蛋白中也存在，如Engrailed蛋白，TCF20和Dermokine蛋白。我们采用表面等离子共振方法证明了Dermokine蛋白与ClfB之间的相互作用。同时，我们把来源于Dermokine的15肽与ClfB共结晶，并解析了这个复合物的结构，通过解析的结构，我们发现15肽与ClfB的结合方式与ClfB-Fg和ClfB-CK10的结合方式是相似的，揭示了ClfB多底物结合的特性。