HIF-1α对结肠癌细胞MDR1基因启动子的调控机制研究

缺氧是实体瘤的基本特性,也是导致肿瘤细胞对化疗药物耐受的重要因素,但缺氧导致肿瘤细胞耐药的分子机制尚不清楚.前期研究发现HIF-1α可通过调控MDR1/P-gp的表达参与结肠癌细胞对化疗药物的耐受,但其调控机制不明.本研究拟构建HIF-1α表达载体及MDR1启动子表达载体，观察HIF-1α对MDR1启动子活性的影响；构建系列不同长度MDR1启动子表达载体并转染至稳定表达HIF-1α的结肠癌细胞，确定受HIF-1α调控的MDR1启动子区作用区域；进而采用EMSA及染色质免疫沉淀方法，对启动子区DNA与转录因子SP1的相互作用进行分析，采用免疫沉淀法对HIF-1α与转录因子SP1有无直接作用进行检测，以评估SP1在HIF-1α调控MDR1表达中的作用价值。这些研究不仅可进一步揭示实体瘤缺氧微环境中肿瘤细胞对化疗药物耐受的分子机制，而且可为逆转肿瘤细胞耐药提供新的策略和新的靶点。

缺氧是实体瘤的基本特性,也是导致肿瘤细胞对化疗药物耐受的重要因素,但缺氧导致肿瘤细胞耐药的分子机制尚不清楚。本研究发现HIF-1α可通过调控MDR1/P-gp的表达参与结肠癌细胞对化疗药物的耐受；进一步构建HIF-1α载体及MDR1启动子表达载体，观察HIF-1α对MDR1启动子活性及表达的影响；构建系列不同长度MDR1启动子表达载体并转染至稳定表达HIF-1α的结肠癌细胞，确定受HIF-1α调控的MDR1启动子区作用区域；进而采用染色质免疫沉淀方法，对HIF-1α与MDR1启动子的相互作用进行分析。这些研究不仅可进一步揭示实体瘤缺氧微环境中肿瘤细胞对化疗药物耐受的分子机制，而且可为逆转肿瘤细胞耐药提供新的策略和新的靶点。