NO调控伏隔核脑区突触可塑性在苯丙胺成瘾戒断中的作用及其机制

药物成瘾是一种特殊的恶性学习记忆过程。已有研究表明，成瘾及戒断所致的VTA和NAc脑区突触传递活动的改变参与了戒断后成瘾记忆和觅药行为的形成。而一氧化氮（NO）在突触可塑性的产生和维持过程中起着非常重要的作用。本课题组前期实验表明，急性给予NO供体SNAP或硝普钠孵育脑片可显著逆转苯丙胺戒断所引起的LTD损伤。由此我们推测，NO通过影响成瘾相关脑区突触神经递质释放，逆转成瘾药物戒断所引起的LTD损伤，从而阻断戒断后成瘾记忆和觅药行为的形成。本课题拟采用电生理、分子生物学和行为学实验等相结合的方法，阐明NO对苯丙胺成瘾戒断后NAc区LTD和成瘾记忆的影响，并探讨NO逆转苯丙胺戒断引起的NAc区LTD损伤的机制，为中枢神经系统神经元及行为可塑性变化的机制研究提供新的认识，为探索和开发以NO为靶点的治疗苯丙胺成瘾戒断的药物提供依据，为研究非成瘾性的拮抗成瘾的药物提供新思路和新策略。

中脑-边缘多巴胺奖赏系统中的伏隔核（Nucleus accumbens，NAc）很早就被认为是大脑的“快乐中枢”之一，在大脑对食物、性、毒品等刺激的奖赏反应中起重要作用。目前精神药理学领域研究认为，成瘾性药物如可卡因、安非他明等会引起伏隔核脑区突触传递和突触可塑性的改变。这种变化源于伏隔核脑区突触表面谷氨酸受体的数目和亚基组成发生了改变。本课题采用蛋白交联的western blotting技术研究大鼠NAc区AMPA受体亚基（GluR1和GluR2）在突触部位的膜表达情况；采用脑片膜片钳技术和场电位记录方法研究NAc区AMPA受体电流和LTD的变化情况；采用自发活动及糖水偏好实验观察可卡因成瘾戒断所致的大鼠行为学变化。结果发现：可卡因戒断导致大鼠NAc区突触部位GluR1和GluR2亚基的蛋白表达出现不成比例的上调，表现为突触表面GluR2的表达相对较少、钙通透性AMPA受体介导的电流增加。进一步研究发现，戒断后NAc区nNOS 的表达、NO的含量，以及N-ethylmaleimide-sensitive factor（NSF）的亚硝基化水平均有所增加，提示可卡因戒断所致的NAc突触表面GluR2亚基表达相对较少可能是因NSF功能不足所致。在可卡因戒断的早期，伏隔核突触表面中含GluR2亚基（GluR2-containing）的AMPA受体会出现增加，抑制成瘾戒断症状的形成。药理学常用的经典药物——一氧化氮供体药能通过亚硝基化一种突触蛋白N-ethylmaleimide-sensitive factor，引起更多的GluR2-containing受体转运上膜，从而放大了这种负性调节机制，抑制可卡因戒断带来的行为可塑性和复吸的奖赏效应，这是一种内源性抑制可卡因戒断症状的负性调节机制