MicroRNA介导的表观遗传调节机制在系统性红斑狼疮肺出血发病过程中的作用

Diffuse alveolar hemorrhage (DAH) is one of the most severe and life-threatening complications in systemic lupus erythematosus (SLE) patients with poor prognosis. According to some recent research results, murine lupus models induced by Pristane are prone to show the manifestation of DAH, on which the epigenetic factors exert indispensable effects. However, the specific mechanism remains poor understood. Our preliminary work has demonstrated abnormal overexpression of miR-155 in pulmonary tissues in DAH murine models. Furthermore, miR-155 shows positive effect on regulation of the key inflammatory NF-κB signaling pathway, indicating its important role both on pulmonary inflammation and DAH. Based on our previous work, plans in this project herein are as follows: 1) To specify on which cell subtypes miR-155 exerts effects, by investigating immunodeficient mice and bone marrow chimeric mice. 2) To identify the novel targets in specific cell subtypes by the usage of RNA-AGO2-CHIPseq. 3) To explore the possibility in treating DAH with nucleic medication of miR-155 antagonist carried by nano-particles. 4) To verify the functional targets of miR-155 in clinical cases studies. Consequently, our researches will not only illuminate the pathogenesis of DAH in SLE patients, but also provide evidence for promising target treatment and prevention of DAH.

弥漫性肺泡出血（DAH）是系统性红斑狼疮（SLE）严重且预后差的并发症，常危及患者生命。近期研究发现Pristane诱导的狼疮小鼠模型常发生DAH，表观遗传因素在此发病过程中发挥了重要作用，但具体机制尚不清楚。我们前期工作发现鼠DAH肺组织局部存在异常高表达的miR-155，且对关键炎症通路NF-κB 具正向调节作用，提示miR-155在肺炎症反应和DAH中发挥重要作用。在上述工作基础上，本项目拟开展：1）通过免疫缺陷型小鼠以及构建骨髓嵌合小鼠，明确miR-155针对何种细胞发挥作用；2）利用RNA-AGO2-CHIPseq探索与鉴定细胞中miR-155的作用靶点；3）探索纳米颗粒载体介导的核酸类药物miR-155拮抗剂治疗DAH的可能性；4）在临床病例中验证miR-155的功能性靶点。本研究不但对阐明SLE弥漫性肺出血的发生机制有着重要意义，而且也为DAH的防治提供新的靶标和实验依据。

背景：弥漫性肺泡出血 （DAH） 是一种危及生命的疾病，临床特征为咯血、血细胞比容下降、弥漫性肺浸润和低氧血症性呼吸衰竭。DAH 的发病机制尚不清楚，由于缺乏特异性靶点，DAH 相关研究在很大程度上受到限制。.方法：为了深入了解DAH机制，首先，我们采用pristane诱导的DAH小鼠模型来模拟DAH在人体内的病理过程。接下来，基于数据独立采集（DIA）方法进行蛋白质组学分析，以检测生存小鼠和非存活小鼠血浆中差异表达的蛋白质（DEPs）以及相关的生物学功能和途径。最后，我们进行了酶联免疫吸附测定（ELISA），以进一步确认DAH患者血浆中最重要的DEP。.结果：本实验共发现178个DEPs，其中118个DP上调，60个DEP下调。检测到20个重要的京都基因和基因组百科全书（KEGG）途径（P<0.05），补体和凝血级联反应被发现是DAH过程中涉及的最重要途径。在基因本体（GO）分析过程中，发现大多数DP参与结合，细胞和代谢过程。通过 ELISA 证实，最重要的 DEP 触珠蛋白 （Hp） 在 DAH 患者的血浆中特异性降低..结论：据我们所知，我们的研究首次描述了DAH小鼠模型的蛋白质组学分析，这有利于更好地了解DAH的发病机制，并为其临床诊断确定潜在的生物标志物。