骨质疏松症大鼠筋膜在热敏灸信号传导中的作用及其MARK通路的研究

Thermal moxibustion is now widely used in clinical treatment of a variety of diseases, its mechanism has started to do research. However, previous studies limited to clinical studies of a disease, and the lack of the whole mechanism. To break this bottleneck, according to preliminary studies the theory on the fascia in the acupuncture mechanism plays an important role ,we have the hypothesis on mechanism of thermal moxibustion : when given the implementation of thermal moxibustion, moxibustion stimulation can around a large number of reversible contraction of fibroblasts fibroblast contraction itself can lead to deformation of collagen fibers, causing the matrix deformation "wave" type conduction, and then reach the connective tissue throughout the gap, the final cell by molecular channel signal (MARK signal) is passed to the different structure and intracellular organelles , chemical conversion, thereby adjusting its physiological function. Hypotheses proposed by modeling 60 osteoporosis rat experiments: using immunohistochemistry, Western ? blot method to observe the morphological changes of the fascia connective tissue fibroblasts, and the study of intracellular moxibustion signal how to transduction. Turn to how to investigate the thermal moxibustion signal is transduced effect, namely how to generate the acupoints thermal phenomenon: deep diathermy expanding thermal, heat transfer, and local (micro) heat far hot surface does not heat (micro) heat.

热敏灸现已广泛有效地应用于临床多种疾病的治疗，并已开始对其机理做相关的研究。但以往研究多局限于某一疾病的临床研究，而缺乏从整体上对其机理进行研究。为破此瓶颈，根据前期研究中有关筋膜在针灸机理中发挥着重要作用的理论，故对热敏灸机理提出假说：实施热敏灸时，灸刺激能使周围大量成纤维细胞可逆性收缩，成纤维细胞收缩本身可以导致胶原纤维形变，进而导致基质变形的"波浪"式传导，而后到达整个间隙结缔组织，最终细胞通过分子通道将信号（MARK信号）传递到胞内不同结构及细胞器上，实现化学转化，从而调节其生理功能。为证实假说，拟通过造模60只骨质疏松症大鼠进行实验：用免疫组化、Western-blot等方法，观察筋膜中结缔组织中成纤维的形态改变，及研究细胞内灸信号是如何转导。进而探讨热敏灸信号是如何转导、产生作用的，即如何产生腧穴热敏化现象：透热、扩热、传热、局部不（微）热远部热、表面不（微）热深部热。

本研究是基于有关学者研究针刺的转导途径及机理而得到启发，因而提出假说：实施热敏灸时，是否是刺激了穴位周围的结缔组织中各细胞及细胞基质，使其发生形态学改变，并使细胞通过特殊的分子通道将信号传递到细胞内不同结构及细胞器上，从而实现化学转化，以调节细胞的生理功能并最终达到疗效的呢？ . 为了证实该假说的成立，我们从解剖学上筋膜的角度来探究热敏灸的机理，以期为热敏灸在临床运用提供科学依据。主要研究内容包括：研究热敏灸热信号是如何转达、产生作用的？如何产生腧穴热敏化现象？证实热敏灸刺激对局部筋膜的细胞形态学的影响及其在细胞信号转导层面的机制。具体而言：分别采用解剖、HE染色、免疫组化、WesternBlot等技术手段，分别观察研究筋膜中结缔组织的形态改变，以及研究细胞内灸信号是如何转导的。. 具体分如下步骤实施：（1）.SD雌性大鼠骨质疏松症模型的制备及评价。（2）.热敏灸对局部筋膜结缔组织形态学所产生的影响。（3）.用免疫组织化学方法观察研究热敏灸后ERKl/2和P38在筋膜中的表达情况。(4).WesternBlot观察研究ERKl/2和P38在筋膜中的表达含量变化。. 通过研究，我们取得了如下重要结果：首先成功制备了骨质疏松症模型大鼠，认为双侧卵巢摘除术的方法可有效制备骨质疏松动物模型，阴道上皮角化细胞检查方法为检验骨质疏松模型的标准。第二，研究了穴位周围的结缔组织的形态学改变：经热敏灸治疗后，各穴位区浅筋膜结缔组织的胶原纤维排列及形态、成纤维细胞、肥大细胞、浆细胞等的形态都有程度不同的改变。第三，热敏灸后，通过各种手段（免疫组化、WesternBlot等）研究发现，P38与ERK1/2等改变显著，而且在浅筋膜表达的阳性区域多集中于浅筋膜中成纤维细胞或巨噬细胞核周围。. 本研究解释了热敏灸作为一种外来刺激，在转化为生物学效应的“细胞内信号转导阶段”是如何在浅筋膜中进行的, 进一步解释了筋膜结缔组织在热敏灸产生灸信号过程中所起到的作用。也是研究热敏灸机理的一个新的尝试。