热敏灸减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的抗线粒体凋亡信号通路研究

本课题组以往的研究表明，穴位是敏化态的疾病在体表的反应部位，即穴位有"静息"与"敏化"的状态之别，选择敏化态穴位进行针灸是提高疗效的关键。穴位的敏化态有多种类型，热敏态是穴位敏化态的一种新类型。热敏灸疗法的理论基础是穴位发生热敏，即穴位在机体病理状态时被激活，由静息态跃迁到热敏态。热敏态穴位对灸热刺激产生"小刺激大反应"， 能够明显提高灸疗疗效。.本研究以大鼠脑缺血再灌注损伤为病理模型，红外成像为穴位热敏态的检测技术，艾灸热敏态"大椎"穴为干预因素，线粒凋亡信号通路及凋亡相关基因等的表达为观察指标，比较艾灸热敏态与非热敏态"大椎"穴在减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的抗凋亡效应方面的差异，阐明热敏灸提高疗效的分子生物学基础，从而为认识人体自身调控系统功能具有较大潜力提供科学线索。

中风又称脑卒中，分为缺血性中风和出血性中风两种类型。其中缺血性中风占80%左右，目前国际上通常使用tPA进行溶栓治疗，但其治疗时间窗小，而且有可能造成出血和水肿，即引起脑缺血再灌注损伤。热敏灸具有减轻脑缺血再灌注损伤的作用，然而其作用机制不清楚。本研究采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）的缺血再灌注模型，采用行为测试法、TTC（2,3,5-氯化三苯基四氮唑）染色法、HE染色法、TUNEL分析法、分光光度法、RT-PCR、Western blot以及免疫组织化学法等观察热敏灸对大鼠模型行为学、形态学、生物化学、分子生物学等方面的影响，首次发现：.（1）热敏灸具有减轻脑缺血再灌注损伤、减少大脑皮质细胞凋亡的作用；.（2）热敏灸可提高大鼠血清和大脑皮质SOD活性、增加大脑皮质SOD2蛋白表达，以及降低血清和大脑皮质MDA含量；.（3）热敏灸可降低大脑皮质细胞色素C(Cyt C)蛋白表达、减少大脑皮质caspase 9 和caspase 3阳性细胞数；.（4）热敏灸可增加大脑皮质Bcl-2 mRNA和蛋白表达、降低Bax mRNA和蛋白表达。.上述结果提示，热敏灸具有减轻脑缺血再灌注损伤的作用，其可能是通过抑制线粒体凋亡信号通路，即包括Bcl-2 家族和 ROS/ Cyt C/caspase 9/ caspase 3信号通路实现的。