益母草碱抗动脉粥样硬化作用及其机制

核因子-κB （NF-κB）是调节动脉粥样硬化（AS）炎症反应的关键转录因子；而氧自由基（ROS）是激活NF-κB的关键中间体和交汇点；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4（Nox4）是血管细胞ROS的主要来源，因此，Nox4/ROS-NF-κB可能是AS的关键调控环节；益母草碱是中药益母草的主要活性成分之一，我们已发现益母草碱抑制缺血心肌中Nox4表达、ROS产生等作用；同时益母草碱抑制内皮细胞炎症反应，表明益母草碱可能具有抗AS作用，但尚无直接证据。本项目拟以高脂饮食复制载脂蛋白E敲除（ApoE ko）小鼠AS模型，观察：⑴明确益母草碱的抗AS作用及作用机制；⑵以整体、细胞为研究对象，结合细胞RNAi干扰Nox4和质粒过表达Nox4技术，揭示Nox4/ROS-NF-κB是AS关键调控环节及益母草碱作用靶点。本课题将揭示Nox4/ROS-NF-κB是AS关键调控环节并明确益母草碱作用靶点。

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶4（Nox4）是血管细胞氧自由基（ROS）的主要来源，核因子-κB（NF-κB）是调节动脉粥样硬化（AS）炎症反应的关键转录因子；因此，Nox4/ROS可能通过激活NF-κB在心血管疾病发生发展过程中起关键调控环节；益母草碱是中药益母草的主要活性成分之一。本研究通过体内、体外实验观察益母草碱抗动脉粥样硬化作用及其与Nox4/ROS信号激活的关系。结果发现：1) 益母草碱在体外通过抑制NF-κB的激活发挥炎症引起的内皮功能紊乱，其作用与降低炎症男因子引起的ROS增加相关；2) Nox4/ROS在动脉粥样硬化相关疾病如心力衰竭过程中显著上升，抑制/沉默Nox4可显著降低心肌纤维化反应，并阐明Nox4是心血管疾病发生发展的关键调控环节；3) 益母草碱能够通过Nox4的表达/活性而发挥抑制心血管疾病的发生、发展。上述结果首次表明Nox4/ROS介导了动脉粥样硬化启动过程，同时也是动脉粥样硬化相关心血管疾病发生、发展的一个关键调控点。