印迹基因TSSC3调控骨肉瘤失巢凋亡的表观遗传机制研究

骨肉瘤细胞抗失巢凋亡是其侵袭和转移一系列步骤中首要的关键步骤，与其高发的肺转移率密切相关。探讨骨肉瘤抗失巢凋亡的分子机制仍然是目前的热点和难点。我们前期研究发现，印迹基因TSSC3与骨肉瘤失巢凋亡相关，在骨肉瘤组织和抗失巢凋亡细胞模型中表达抑制或沉默，但其表达抑制的调控机制目前尚不明确。结合文献及预实验结果，我们认为：TSSC3基因的表达抑制与其启动子区DNA甲基化和组蛋白甲基化等表遗传学修饰有关。为此，我们拟从以下几个方面研究骨肉瘤细胞失巢凋亡过程中：①TSSC3基因启动子区DNA甲基化和组蛋白甲基化修饰的变化情况；②TSSC3基因启动子区DNA甲基化与组蛋白甲基化修饰的相互作用；③组蛋白甲基转移酶EZH2的活性变化规律及对TSSC3基因DNA启动子区组蛋白甲基化的作用和机制。研究结果将对阐明骨肉瘤抗失巢凋亡的分子机制，开辟新的表遗传学治疗靶点具有新的理论和实验依据。

印迹基因TSSC3在骨肉瘤中发挥抑癌基因的作用，它的表达主要受表观遗传学调控。首先，我们用5-Aza-CdR处理骨肉瘤细胞后，TSSC3的表达得到回复，这一作用是通过其对基因启动区的去甲基化达到的。以上研究表明，TSSC3在骨肉瘤中的低表达是由其启动子区的高甲基化所介导的，而甲基化是介导肿瘤抑癌基因低表达最常见的表观遗传学调控机制之一。其次，我们的研究表明，敲低EZH2后，可使得TSSC3在骨肉瘤中的表达明显回升，进而发挥一系列功能：在体外实验中，敲低EZH2后骨肉瘤细胞的增殖能力、侵袭迁移能力明显下降；而在体内实验中，敲低EZH2显著抑制了骨肉瘤的肿瘤生长能力和远处肺转移能力。以上研究可能为抑制骨肉瘤的生长和转移提供了新的分子机制，并为未来骨肉瘤药物治疗特别是表观药物治疗提供新的新靶标。EZH2是核心蛋白复合体2（PRC2）的催化亚基，通过催化组蛋白H3第二十七位赖氨酸的三甲基化（H3K27me3）来抑制靶基因的表达，且多针对抑癌基因，我们的研究表明EZH2正是通过H3K27me3介导TSSC3的表达沉默。以上研究，可更深入阐明骨肉瘤发生发展过程中印迹基因TSSC3的功能和表遗传学调控机制，为探讨骨肉瘤的发生及转移机制研究以及对骨肉瘤的防治提供理论和实验依据。