印迹基因TSSC3靶向肌成纤维细胞介导失巢凋亡抑制肾间质纤维化的作用及其分子机制

Myofibroblast activation is the key event of the irreversible RIF . Anoikis resistance is the hallmarker of active MyoFb conferred by the continuous activation of the FAK/Src-AKT pathway. Therefore MyoFb anoikis induced by targeting FAK/Src-AKT pathway will be hopeful an effective way of RIF treatment. Our previous study found that TSSC3 imprinted gene enhanced the sensitivity of cells to anoikis through interaction with Ranbp9 to suppress the Src activation. Accordingly, we hypothesize that MyoFb anoikis induction by TSSC3 targeted transfection may suppress RIF by inhibiting the FAK/Src-AKT pathway. We transfect the lentivirus of specific promoter α-SMA-TSSC3 into MyoFb both in vitro and in vivo, then detect that anoikis, growth, motility, the renal function and the degree of fibrosis of UUO rat. Furthermore, we discuss the mechanism of TSSC3 suppressing RIF through regulating the FAK/Src-AKT pathway. The purpose of this project is to provide new ideas for the antifibrosis treatment of MyoFb targeted.

肌成纤维细胞（MyoFb）活化是不可逆性肾间质纤维化（RIF）形成的关键。FAK/Src-AKT信号途径的持续激活使MyoFb获得失巢凋亡抵抗能力继而活化，因此通过抑制FAK/Src-AKT信号途径促进MyoFb失巢凋亡有望成为治疗RIF的有效手段。我们前期研究发现印迹基因TSSC3通过与Ranbp9相互作用抑制Src激酶的活性增加细胞失巢凋敏感性。据此本项目提出"TSSC3特异性靶向MyoFb抑制FAK/Src-Akt信号激活介导其失巢凋亡延缓RIF"的假说。采用α-SMA启动子调控的TSSC3慢病毒特异性感染MyoFb，检测TSSC3对MyoFb失巢凋亡、生长、运动等生物学特性以及UUO大鼠肾功能、纤维化的影响，并进一步探讨TSSC3调控FAK/Src-AKT信号途径抑制RIF的分子机制，为靶向MyoFb的抗纤维化治疗提供新思路。

肌成纤维细胞（MyoFb）活化是不可逆性肾间质纤维化（RIF）形成的关键。FAK/Src-AKT信号途径的持续激活使MyoFb获得失巢凋亡抵抗能力继而活化，因此通过抑制FAK/Src-AKT信号途径促进MyoFb失巢凋亡有望成为治疗RIF的有效手段。我们前期研究发现印迹基因TSSC3通过与RanBP9相互作用抑制Src激酶的活性增加细胞失巢凋敏感性。据此本项目提出“TSSC3特异性靶向MyoFb抑制FAK/Src-Akt信号激活介导其失巢凋亡延缓RIF”的假说，为靶向MyoFb的抗纤维化治疗提供新思路。.本项目围绕这个核心科学假说开展研究，取得如下发现：1、TSSC3与RanBP9形成相互作用的蛋白复合物通过调节Src介导的PI3K-Akt途径抑制了失巢凋亡抵抗及肿瘤的转移；2、TSSC3通过调节PI3K-Akt途径抑制了TGF-β诱导的MyoFb的失巢凋亡抵抗及促纤维化的能力；3、TSSC3通过调节Wnt/GSK-3β/β-catenin/snail通路诱导MET抑制了骨肉瘤的侵袭及转移潜能；4、荟萃分析提出血清抗PLA2R抗体对原发性膜性肾病具有诊断价值，但需结合病人的临床特征（蛋白尿的程度、免疫抑制剂使用情况、取样距离肾活检时间等）进行综合判断；而肾组织PLA2R抗原检测比血清抗PLA2R抗体更加敏感，因此建议在血清anti-PLA2R抗体阴性的患者进行肾组织PLA2R抗原检测；.本项目研究结果在国际上首次揭示了骨肉瘤失巢凋亡抵抗导致肿瘤转移的一种新机制，即RanBP9与TSSC3以蛋白复合物的形式发挥协同作用，通过调节Src介导的PI3K-Akt途径抑制了失巢凋亡抵抗及肿瘤的转移，相关研究成果发表在细胞死亡经典期刊《Cell Death and Disease》上。并且在研究过程中我们额外发现TSSC3还可通过调节Wnt/GSK-3β/β-catenin/snail通路诱导MET抑制了肿瘤的侵袭及转移潜能，相关研究成果发表在肿瘤经典期刊《Cancer Letter》上。我们还第一次证实TSSC3通过调节PI3K-Akt途径抑制了MyoFb的失巢凋亡抵抗及促纤维化的能力，目前正在总结成文。.综上所述，本项目全面提示了TSSC3在抑制失巢凋亡抵抗从而发挥抗肿瘤及抗纤维化的作用及其分子机制，为靶向失巢凋亡抵抗细胞的抗瘤及抗纤维化治疗提供了潜在的干预策略。