高频短波胃电刺激调控胃感觉功能的外周迷走神经通路研究

胃感觉是胃的重要生理功能，许多消化道疾病患者存在胃感觉异常，目前缺少有效的治疗药物。高频短波胃电刺激是治疗消化不良的新方法，已有研究证实该方法可改善胃功能性疾病患者胃感觉功能异常，但作用机制不明。我们的前期研究证实迷走神经及其中的辣椒素敏感神经纤维参与介导高频短波胃电刺激的治疗作用；迷走神经传入纤维神经元胞体位于nodose和jugular神经节，因此针对迷走神经nodose和jugular神经节的研究对阐明高频短波胃电刺激的外周传导通路有重要意义。基于此，本研究拟采用组织-神经电生理技术、共聚焦显微镜技术、Wester-blot技术、神经示踪技术和免疫组化技术深入研究nodose和jugular神经节中参与介导高频短波胃电刺激治疗作用的神经纤维、神经递质、受体及离子通道，为阐明高频短波胃电刺激改善胃感觉功能的神经调控机制及今后对胃感觉功能异常的治疗奠定基础。

本研究采用神经示踪技术、免疫组化技术、共聚焦显微技术、RT-PCR技术研究了高频短波胃电刺激时大鼠nodose和jugular神经节中感觉神经递质的变化，以期阐明介导高频短波胃电刺激调控胃感觉功能的外周神经通路。结果表明：1）高频短波组在电刺激组神经微丝蛋白（NF）较对照组和低频长波胃电刺激组明显减少，差异具有统计学意义（P<0.05），低频长波组与假性刺激组无明显差异。高频短波组同另外两组相比，在胃相关的迷走神经nodose神经节A类纤维（NF阳性）与DIL示踪阳性的神经元共表达减少；2)高频短波组电刺激NF阳性纤维中组钙基因相关肽（CGRP））较对照组和低频长波胃电刺激组明显减少，差异具有统计学意义（P<0.05），低频长波组与假性刺激组无明显差异；3）高频短波组NF阳性纤维中ACH表达较对照组和低频长波胃电刺激组明显增多，差异具有统计学意义（P<0.05），低频长波组与假性刺激组无明显差异；4）高频短波组NF阳性纤维中VIP较低频长波组与假性刺激组表达明显增多，差异具有统计学意义（P<0.05），低频长波组与假性刺激组无明显差异；5）高频短波组NF阳性纤维中P物质较较低频长波组与假性刺激组表达明显减少，差异具有统计学意义（P<0.05），低频长波组与假性刺激组无明显差异。6）RT-PCR显示高频短波胃电刺激显著增加VIP表达和降低cGRP、SP和5-HT1a表达；7）进一步研究表明，外周神经示踪剂可通过神经节传导入中枢孤束核，短波胃电刺激可增加孤束核c-fos表达，SP拮抗剂显著增加短波胃电刺激所致孤束核c-fos表达。结论：高频短波胃电刺激通过外周感觉神经经由nodose和jugular神经节影响中枢孤束核神经活性，外周参与递质和受体包括cGRP、Ach、SP、VIP及5-HT1a受体，最终经由SP影响中枢孤束核神经活性。