炎症激活胎膜细胞ADAMTS9引起早产胎膜早破的相关性研究

Preterm birth usually happened in the 28th ~ 37 weeks of gestation, which is the leading cause of perinatal morbidity and morbidity world wide. It is pressing that exploring biomarkers specifically and sensitivelly predict the incidence of preterm birth. In numerous of incentive of preterm birth, 25~30% result from preterm premature rupture of membranes, which is interrelated with inflammation. ADAMTS (A Disintegrin And Metalloproteinases with Thrombospondin motifs), may participate in the process of preterm premature rupture of membranes by activate the pathway of inflammation in macrophages, and the mRNA concentration of ADAMTS9 and in fetal membrane are significant differences. To confirm whether ADAMTS9 reduce the occurrence of preterm birth, we first measured the quantity of mRNA and protein in gravida full-time birth(FTB), preterm birth without rupture of membranes(PTB), full-time birth with rupture of membranes(FPROM), and preterm premature rupture of membranes(PPROM), which show a interesting tendency of ADAMTS9. Next we build lentivirous which will knock down the expression ADAMTS9, then transfer the lentivirous into human amniotic membrane cell line - WISH cell line, and then establish a specific ADAMTS9 knocking down mice, finally we transfer the ADAMTS9 knocking down lentivirus into human primary cell of normal gestation, to investigate the regulation of ADAMTS9 in preterm premature rupture of membranes .

早产是围生儿患病与死亡的重要原因之一。有25~30%的早产由胎膜早破引起，与感染密切相关。A解聚素和金属蛋白酶及血小板反应蛋白基序（ADAMTS）家族调节巨噬细胞炎症因子及趋化因子激活，降解胎膜的细胞外基质而引起早产胎膜早破是重要的理论基础，但具体机制不清。我们前期发现ADAMTS9，TNF-ɑ，IL-6，在发生早破的胎膜组织中mRNA含量具有显著差异性，据此推测ADAMTS9胎膜早破中发挥重要作用。本研究通过检测足月与未足月、有无发生胎膜早破病人羊膜细胞中ADAMTS9 mRNA含量及蛋白表达量，同时利用慢病毒转染人羊膜细胞系，构建ADAMTS9特异性基因敲除小鼠妊娠模型，最后慢病毒敲降正常妊娠孕妇原代胎膜细胞中ADAMTS9，检测ADAMTS9在炎症造成的细胞损伤中对胎膜细胞的作用。

项目简介：早产是围生儿患病与死亡的重要原因之一。有25~30%的早产由胎膜早破引起，与感染密切相关，并且其一旦发动无法停止。目前对于早产的治疗方法多采用抑制宫缩及对症治疗感染，没有明确指标来预测早产的发生。A解聚素和金属蛋白酶及血小板反应蛋白基序（ADAMTS）家族调节巨噬细胞炎症因子及趋化因子激活，降解胎膜的细胞外基质而引起早产胎膜早破是重要的理论基础，但具体机制不清。我们前期发现ADAMTS家族中相关蛋白及细胞因子在发生早破的胎膜组织中mRNA含量具有显著差异性，据此推测ADAMTS家族蛋白在胎膜早破中发挥重要作用。我们通过检测足月与未足月、有无发生胎膜早破病人羊膜细胞中相关蛋白mRNA含量及蛋白表达量，同时利用慢病毒转染人羊膜细胞系，构建特异性基因敲除小鼠妊娠模型，检测ADAMTS家族蛋白在炎症造成的细胞损伤中对胎膜细胞的作用。从而研究早产发生的疾病机制，为探索开发早产预测生物标志物奠定基础。.主要发现：我们发现不同组之间的 ADAMTS9 蛋白和基因表达水平存在显着差异（早产胎膜早破>足月产胎膜早破>非胎膜早破早产>非胎膜早破足月产）。在人羊膜细胞WISH细胞中抑制ADAMTS9后，TNF-α和IL-6诱导的细胞凋亡减少。此外，与对照组相比，用LPS处理的小鼠胚胎中的TNF-α、IL-6和ADAMTS9蛋白和基因表达水平增加。与对照组相比，LPS组的早产率更高。综上所述，炎症期间TNF-α和IL-6调节ADAMTS9并诱导早产胎膜早破。