应用mRNA差异显示技术克隆平菇子实体分化发育基因

本研究以平茹菌丝体及原基、菇蕾和成熟子实体等不同分化发育阶段子实体为材料，分别提取总RNA，并经DD-PCR和RAP-PCR两种差异显示方法进行了扩增。从扩增产物中选择11条差异片段进行回收、重扩增、克隆和鉴定，并经序列分析与BLAST检索，有三条片段其序列在GenBank中找到同源基因序列。 这三个克隆的基因片段被分别命名为PoHyd4,PoPriA与PoHsp70，其中PoPriA与PoHsp70在平菇中均为首次报道，PoHyd4也是一个新的Hydrophobin基因。Northern杂交证实三个基因在平菇菌丝体与子实体中呈差异表达，表明它们确为子实体分化发育相关基因。此外还获得了PoHyd4与PoPriA基因的全长cDNA序列，并在GenBank中申请了注册，其注册号分别为AF331452与AF331453。