c-Cbl环状功能域抑制剂的合成与活性筛选

Cbl蛋白是一类在生物体内广泛分布的细胞内蛋白，属于泛素连接酶E3系。近年的研究表明，c-Cbl的环状功能域参与了机体能量平衡调控，是治疗糖尿病等代谢性相关疾病的潜在药物靶点，然而目前对c-Cbl环状功能域抑制剂的研究尚为空白。本实验室根据c-Cbl的环状功能域结构特点设计合成了三个基础多肽，成功地抑制了c-Cbl与其他蛋白的结合，干扰了其参与身体能量平衡的调控，最终导致脂肪细胞生长速率减缓，显示出该类抑制剂作为治疗代谢性疾病药物的可能性。在此基础上，本研究拟进一步通过基于片段的药物设计及多肽固化合成技术合成系列小分子多肽类似物抑制剂，利用已建立的极化荧光筛选模型对其进行体外筛选，并对活性较好的化合物进行优化，同时通过2型糖尿病模型初步评价其药理作用。以上研究将有助于对c-Cbl环状功能域作为新的药物靶点进行鉴定与确证，为靶向c-Cbl环状功能域的药物研发提供科学依据和实践指导。

本项目以c-Cbl的环状功能域氨基酸序列及三维空间结构为靶点，设计合成了能特异识别该结构域的氨基酸结构单元和三个系列的小分子化合物。课题组建立了以极化荧光为基础的高通量筛选c-Cbl环状功能域抑制剂的检测方法，研究了这些小分子化合物对该结构域的识别能力和对c-Cbl环状功能域的抑制活性；总结了抑制剂结构-活性关系，筛选了合成的91个多肽及多肽类似物的活性，并通过稳定性、泛素化测试、免疫沉淀、全身能量平衡测定及2型糖尿病模型评价了待选化合物的活性，最终筛选出了6个有应用前景的c-Cbl环状功能域抑制剂，有望开发为治疗2型糖尿病、动脉粥样硬化及肥胖等代谢性疾病的新药。