c-Met基因沉默联合传统放、化疗或靶向治疗对结直肠癌生长、转移的影响及分子机制的研究

以手术为主，辅以化疗、放疗或以VEGF和EGFR为靶点的生物靶向治疗是当前结直肠癌的主要治疗手段。但肿瘤发生区域淋巴结或远处转移常导致治疗失败，而原发或继发性耐药以及对放射线抵抗也是困扰其临床疗效的主要障碍之一。酪氨酸激酶受体c-Met是一类在结直肠癌中呈高表达，且与肿瘤浸润和淋巴结、肝转移有关的分子，正在成为结直肠癌新的治疗靶点。但是抑制c-Met信号途径是否能够增强SW620及其他结直肠癌细胞系的放化疗及其他靶向治疗的效果并不清楚。本课题拟在现有研究基础上，从分子、细胞及实验动物整体水平探讨沉默c-Met基因联合传统化疗、放疗或靶向治疗在抑制结直肠癌生长转移中的意义，并探讨相关分子机制，为临床试验和制定结直肠癌新的治疗策略提供依据。

1）成功地在结直肠癌细胞系SW620，HCT-116, HT-29中建立了c-Met基因可调控表达稳定细胞系SW620-PSD400-c-met-shRNA，HCT-116-PSD400-c-met-shRNA, HT-29-PSD400-c-met-shRNA以及阴性对照细胞系SW620-PSD400-scramble-shRNA, HCT-116-PSD400-scramble-shRNA , HT-29-PSD400-scramble-shRNA。.2）定量沉默c-Met基因可以与化疗药物5-Fu、顺铂或紫杉醇协同地抑制结直肠癌细胞增殖，对伊立替康联合则无增敏作用。而在结直肠癌移植瘤模型中，c-Met抑制剂PHA-665752对化疗有增敏作用。.3）在体外，定量沉默c-Met基因可以对放疗增敏；而在结直肠癌移植瘤模型中，c-Met抑制剂PHA-665752对放疗有增敏作用。.4）c-Met抑制剂PHA-665752联合靶向药物在不同突变型的人结直肠癌细胞系中作用不同。在体外，c-Met抑制剂联合西妥昔单抗对KRAS/BRAF 双野生细胞Caco2有协同抑制作用；对KRAS p.G13D或KRAS p.G12V 突变细胞（HCT-116 ，SW620）有轻度抑制作用；对BRAFV600E突变细胞（HT-29）则无抑制作用；在体内，c-Met抑制剂联合西妥昔单抗对结直肠癌移植瘤有协同抑制作用。c-Met抑制剂联合贝伐单抗无论在体外还是体内均对结直肠癌有协同抑制作用。.5）探讨了上述作用的机制。