烟草BY-2细胞胞质分裂相关基因NtRCP1的功能分析

细胞分裂是植物生长发育的基础。相比动物细胞，植物细胞周期调控研究相对滞后。在前期工作中，我们从BY-2细胞中克隆了RING finger 基因NtRCP1，初步实验表明其蛋白可能是胞质分裂的负调控因子。本课题拟在此基础上，对NtRCP1的细胞内功能进行深入研究：1.分析NtRCP1在细胞周期不同时相中的表达谱，并通过RNAi等方法分析NtRCP1的抑制表达对BY-2细胞分裂的影响，以进一步确证其对细胞分裂的负调控作用；2.检测 NtRCP1的E3 连接酶活性及其相互作用蛋白，了解其作用机理是否基于对靶蛋白的泛素化降解；3.检测NtRCP1对酵母突变体dma1的功能补救作用，据此分析植物细胞内是否存在类似于酵母的、有NtRCP1参与的纺锤体检查点。本研究的意义是能为植物细胞周期调控的分子机理研究提供新的实验依据，并有可能获得突破性进展。