基于“NMR代谢组学”的围绝经期综合征肝郁与肾虚的证候学基础研究

Perimenstrual syndrome (PMS) affects millions of women and it is of great importance to decipher its underlying courses for diagnosis and treatment of the disease. Our earlier work showed that the kidney deficiency (KD) was the basic pathophysiological characteristics of PMS, yet liver stagnation (LS) is the key cause through the whole course. To elucidate the syndromic basis and to analyse the PMS-associated KD and LS, a rat model for PMS will be established, so the metabolic characteristics of DK and LS can be investigated by NMR spectroscopy after the intervention by established prescriptions. The following researches are proposed: 1)investiate KD and LS’s pathophysiological appearance in rats,with the method of ‘by means of prescriptions to speculate the symptoms’; 2) characterize the metabolic changes before and after the treatment by NMR; 3) Based on the metabolic patterns, establish a link between the disease and the possible cellular signal transduction pathways. These works will allow us to set a plateform for in-depth study on differentiation of KD and LS, enriching our Chinese medicinal understanding on PMS, and providing a theoretical basis for diagnosis and treatment of the disease.

围绝经期综合征（PMS）是影响女性健康的重要疾病，表现为神经及内分泌系统失调、植物神经功能紊乱、心理精神症状等一系列临床症状。申请者前期的研究工作表明，肾虚是围绝经期的基本生理病理特点，肝郁是PMS的核心病机，贯穿疾病全过程。为进一步阐明PMS肝郁与肾虚的机理及不同证候产生的分子生物学机制，本研究在前期基础上，采用动物实验的方法，以自然衰老和束缚法建立PMS大鼠模型，并进行以下研究：（1）分别以疏肝、补肾、疏肝补肾的代表方剂为探针，以方测证，确定PMS大鼠模型的中医证候特征；（2）以NMR手段检测并分析用药前后代谢底物的变化，研究肝郁和肾虚的NMR代谢组学特征；（3）分析PMS的细胞信号通路变化，阐明肝郁、肾虚病理、证候可能的微观机制。本项目以探索绝经期前后NMR代谢组学特征为起点，观察PMS的代谢组学相关标记物，能够进一步丰富PMS中医病因病机理论，为本病的辨证和中医药防治提供依据。

围绝经期综合征是影响中年女性生活质量的公共健康问题，肾虚是围绝经期的基本病理特点，肝郁是PMS的核心病机，但其症候学基础尚不清楚。因此本研究采用病症结合与以方测证的方法，以围绝经期肾虚肝郁动物模型为研究对象，从疏肝补肾角度探讨围绝经期肝郁与肾虚的机理及不同证候产生的分子生物学机制。.结果显示：（1）动物行为学验证围绝经期肝郁大鼠模型建立成功，疏肝补肾法降低HPA轴亢进，调控P38MAPK、ERK5信号通路表达，有效改善PMS肝郁证大鼠抑郁样行为。（2）围绝经期综合征大鼠肾虚证候的代谢特征表现为脂质、葡萄糖和氨基酸的能量代谢上调，脂相关代谢物和三甲胺-N-氧化物标志的心血管病风险上升；肝郁证候的代谢特征表现为神经内分泌激素、神经递质紊乱，脂代谢降低、糖代谢增高。（3）补肾法、疏肝法及疏肝补肾法代表性中药方干预后，在未显著提升雌激素水平的情况下，病证模型大鼠的代谢网络均在不同程度上得到了修复，其中疏肝补肾法同时上调了氨基酸代谢，修复力度最强，效果优于单一的治法，可把围绝经期综合征肝郁模型大鼠的代谢水平调回到围绝经期早期状态，部分指标甚至达到正常育龄时期水平。（4）不同状态下大鼠血清的代谢产物存在显著差异。从代谢组学的结果分析表明，丙酮酸是围绝经期综合征发生和发展潜在的生物标志物。不饱和脂肪酸和丙酮是肝郁发生和发展潜在的生物标志物。肌酸、三甲胺-N-氧化物、胆碱和丙酮酸是区分肾阴虚与肾阳虚潜在的生物标志物，甘氨酸、缬氨酸、异亮氨酸和亮氨酸是肾虚肝郁证潜在的生物标志物。.本项目获中华中医药学会科学技术奖二等奖1项；发表学术论文16篇，其中SCI论文4篇；培养博士研究生2名，硕士研究生3名。