细胞凋亡蛋白Daxx对p53功能调节的研究

p53肿瘤抑制因子是通过阻止受损细胞生长，诱导它们凋亡或老化等机制来防止肿瘤产生的。在正常细胞中，p53的这种阻碍细胞生长的功能是受到了严格的抑制；细胞受到损伤时，抑制p53功能的机制得以解除，p53快速激活从而抑制肿瘤产生。我们的前期研究表明，死亡域结合蛋白（Daxx）在正常细胞中能和p53的泛素化连接酶Mdm2结合， 提高Mdm2的稳定性，促使Mdm2有效的降解p53，从而抑制p53的功能。 DNA损伤信号则能引起Daxx和Mdm2的解离。另外Daxx也能和p53结合，并也受DNA损伤信号调节。 这些研究结果表明Daxx可能是p53激活中的重要调节因子。 本项目将研究Daxx在p53激活及功能调节中所起的作用：1）Daxx在DNA损伤刺激中发生的磷酸化及Daxx-Mdm2解离的分子机制； 2）Daxx对p53转录功能的调节。

p53是功能最重要的肿瘤抑制因子之一，它可通过诱导有癌变倾向的细胞发生凋亡和衰老，有效抑制肿瘤的产生。Mdm2不仅是 p53最主要的负调控蛋白，而且是p53活化过程中的关键调控点。 在前期工作中我们发现凋亡相关蛋白Daxx能和Mdm2相互结合并通过提高Mdm2的稳定性影响p53的活性，而且Daxx-Mdm2在DNA损伤刺激下发生解离。本项目主要研究了Daxx-Mdm2解离的分子机制和其在p53活化中的作用。我们基本上按原计划的研究内容探明了DNA损伤刺激诱导Daxx-Mdm2解离的分子机制。我们发现在DNA损伤刺激下，Daxx在564位丝氨酸(Ser)发生了磷酸化，而且该磷酸化由ATM激酶直接催化产生，参与了Daxx与Mdm2的解离调控，促进了p53的活化。此外我们发现Daxx还能在C-末端Sumo结合区737及739位Ser发生CK2介导的磷酸化，调节Daxx和Sumo-1的结合；而且Daxx蛋白稳定性受Mdm2和去泛素化酶Hausp的相互调控。另外根据本计划进展中的一些发现，我们还拓展研究了Mdm2的一些其它调控机制, 发现在p53缺失的肿瘤细胞中，核糖体损伤刺激可引起Mdm2发生类泛素Nedd8修饰，抵御细胞凋亡；我们还发现核糖体蛋白S26是调控Mdm2-p53系统的新因子。在基金的资助下，目前我们已发表了两篇SCI文章，分别刊登在DNA Repair及BBRC上，另外还有一篇在投稿之中。