木通皂苷D对正畸牙齿移动的作用及机制研究

Traditionally,the general rate of orthodontic tooth movement is 1 mm per month.Therefore,the duration of orthodontic treatment is generally about two years or longer.How to move the teeth quickly and safely is of great concern for orthodontists all over the world since the 1970's.After Yamasaki found that prostaglandin can induce more efficient OTM in 1982,more and more drugs that can accelerate tooth movement have been discovered.Recently,attention has been turned from these medicines towards traditional Chinese medicine (TCM) which is known as lower price and little side effects.However,as the chemical constituent of TCM is complicated,the TCM may act on multi-targets to play a role in clinical treatment.With the fast development of biotechnology and modernization of TCM,many extract of major active constituent of TCM were isolated and identified.The single active ingredient of TCM is gradually applied to experimental studies.Meanwhile,the development of gene chip technique provides a new method for study on the mechanism of TCM in orthodontic tooth movement,which can discover multi-targets by conducting one experiment.Through this may we want to find if Asperosaponin D which was extracted from Dipsacaceae can really increase the rate of tooth movement and its possible mechanism,so we can provide experiment basis for clinic OTM.

正畸治疗周期一般为1-2年，拔牙矫治时间更长。因此，自20世纪70年代以来，学者们便开始了对加快正畸牙齿移动的探索。自从学者Yamasaki在移动牙齿周围局部注射前列腺素取得肯定疗效后，越来越多的药物被应用于加速正畸牙齿移动的研究中，如维生素D，降钙素等。近年来，传统医药越来越受关注，但由于中药化学成分的复杂性，中药促进牙齿移动的具体机制很难揭示。随着生物技术的发展，越来越多的中药有效成分被分离和鉴定，使从细胞分子水平研究中药的作用机制成为可能。同时，由于基因芯片技术的出现，使我们能通过一次实验发掘大量的药物作用靶点，并同时获取大量作用机制的相关信息，这种高通量的分析手段为中药在正畸牙齿移动中作用机制的研究提供了新的思路和方法。本研究利用基因芯片技术，通过对补肾中药川续断中的主要活性化学成分木通皂苷D在大鼠正畸牙齿移动中的作用机制进行初步探讨，为中药在正畸临床上应用提供一定的理论基础。

正畸治疗周期一般为1~2年，因而国内外学者一直关注于加快正畸牙齿移动，探索缩短正畸治疗疗程的方法。ASD为川续断的主要有效成分，药效学实验表明其具有抗骨质疏松、增加骨密度的作用。我们通过体内及体外实验探究ASD在加速正畸牙移动过程中的作用机制，为中医药在正畸临床上的应用提供一定理论基础。. 体内实验通过对大鼠正畸牙移动模型局部注射不同浓度（5 mg/kg，10 mg/kg）ASD溶液，探讨其对正畸牙齿移动速度的影响。局部注射ASD可有效提高大鼠正畸牙齿移动速度，增加牙齿移动距离，且可加速牙周组织改建，增加牙周组织破骨细胞数目及ODF的表达，从而加快正畸牙齿移动。. 体外实验显示，不同浓度的ASD促进人牙周膜干细胞成骨向分化呈浓度相关性，浓度在10-5M时最强。机械力刺激和ASD均可促进牙周膜干细胞成骨向分化，RT-PCR结果提示该作用与GPR30以及Hippo信号通路下游效应因子YAP、TAZ相关。进一步的研究机制显示沉默GPR30基因后，ASD促进牙周膜干细胞成骨向分化作用减弱，与未转染组相比，ALP、RUNX2表达降低，同时YAP、TAZ表达降低。沉默Hippo通路下游因子YAP后，ASD促进成骨作用减弱，而GPR30的表达在ASD干预的转染组和未转染组差异不大。说明ASD促进人牙周膜干细胞成骨向分化的作用可能是通过GPR30受体调控Hippo信号通路，促进YAP的脱磷酸化并入进细胞核而发挥作用。