龙血竭聚合色素的结构、功能和形成机理研究

血竭为"活血圣药"，具活血化瘀等功效，可用于多种血症的治疗。国产龙血竭是剑叶龙血树（Dracaena cochinchinensis (Lour.) S.C.Chen）树干受到损伤变为红色后，含脂木材的乙醇提取物，但其主要化学成分尚不清楚。本项目通过HPLC-UV-MS预判指导下，以膜分离结合凝胶和反相色谱层析，HPLC和HSCCC制备等新技术，分离纯化龙血竭中的多酚类聚合色素成分（特别是红色色素）；以体内外抗凝血和抗心肌缺血模型，研究其对心血管系统的生理活性，以阐明龙血竭主要成分的结构、功能，对血竭药用资源的合理利用及开发有重要意义。并通过单聚体的不同组合，以体外酶促反应研究聚合的过程和规律，探讨聚合色素可能的形成机理，为生物技术方法生产龙血竭，实现人工促脂分泌， 促进龙血竭原料的可持续利用提供理论依据与技术手段。

血竭为中医药之“活血圣药”。上世纪70年代著名植物学家蔡希陶教授在云南南部发现剑叶龙血树(Dracaena cochinchinensis S. C. Chen)产生的树脂可以作为正品血竭的国产代替品，现已成为市场上主流品种。为了进一步系统研究其化学成分，以现代植物化学研究方法，利用各种分离纯化手段，对国产龙血竭进行了系统地化学研究，共分离鉴定了48个化合物，包括8个新化合物，23个为首次从国产龙血竭中分离得到。.龙血竭中不同类型成分的紫外光谱特征有很大差异，以配有二极管阵列检测器(DAD)的高效液相色谱(HPLC)，可在线定性定量分析血竭的质量优劣。比较了不同产地和来源的血竭样品，发现黄烷和二氢查耳酮等黄酮类成分为龙血竭的主要成分。而国产龙血竭成分是最接近于北非和阿拉伯地区原产的血竭（Dragon’s Blood of D. draco）。. 抗菌实验表明，大部分酚性成分具有抗菌活性，其中简单的小分子酚性成分的抗菌活性最强。龙血竭酚性成分是剑叶龙血树树干受到损伤后在微生物的侵染和氧化作用下逐渐形成。从龙血竭成分形成的规律看：龙血树树干原化学成分以甾体皂苷为主，酚性成分含量很少；而受病原微生物侵袭形成红色树脂后，则主要成分转化为酚性成分，说明这些具有抗菌活性的酚性化合物就是剑叶龙血树所产生的植物防卫素，其形成具有生物学意义。. 龙血竭的主要化学组成是聚合色素类成分，形成机理还未发现，从结构上看，可能是由单体查尔酮氧化聚合而成。为简化研究这一过程，本实验将主要黄烷、二氢查尔酮以及简单酚性成分单聚体的不同组合进行了体外多酚氧化酶酶促反应，检测分析酶促反应前后化学成分的变化，发现黄烷、二氢查尔酮可以与简单酚性成分发生聚合反应，简单酚性成分的原来酚邻位或对位间可与黄烷、二氢查尔酮的γ位形成碳-碳键，说明多酚氧化酶对聚合反应的作用。通过龙血竭形成机理的研究，为生物技术方法生产龙血竭，实现人工促脂分泌，促进龙血竭原料的可持续利用提供理论依据与技术手段。. 对龙血竭中得到的主要单体成分进行了抗氧化、抗凝血体外活性筛选，发现黄烷、二氢查尔酮、二苯乙烯等酚性成分具有显著的抗氧化活性，并能抑制血小板激活因子（PAF）诱导的血小板聚集。首次确证了龙血竭中聚合色素的抗凝血作用，证明了龙血竭活血化瘀、消肿止痛等功效的物质基础。