凉血解毒重镇法对寻常型银屑病进行期患者T淋巴细胞Notch信号调控的研究

as the research object to psoriasis patients in the active state, we will observe variation of Th1/Th2/Treg/Th17 lymphocyte subsets and cytokines before and after the analysis of Cooling blood detoxification and ZhongZhen method intervention,By gene chip and Realtime PCR methods, after different compatibility of traditional Chinese medicine intervation cells, To verificate differentially expressed genes of the Notch pathway；then by Western blot method, to further verify the protein expression of those, According to the study above, we explore the molecular biological mechanism of Cooling blood detoxification and ZhongZhen method intervented Psoriatic T lymphocytes of Notch signal regulation.

本项目以寻常型银屑病进行期患者为研究对象，以正常人为对照，分析“凉血解毒重镇法”治疗前后Th1/Th2/Treg/Th17淋巴细胞亚群及相关细胞因子的变化，利用生物芯片筛选Notch通路相关差异基因，Realtime PCR验证差异基因的mRNA表达、western blot验证差异基因的蛋白表达，结合靶基因Hes-1的mRNA及蛋白表达的变化，研究“凉血解毒重镇法”对寻常型银屑病进行期的治疗效应与Notch信号调控的相关基因、蛋白关系，以期阐释寻常型银屑病进行期“易致毒、易夹瘀”的中医复杂证候的现代分子机制。

银屑病是皮肤病领域严重危害人类健康的常见病和多发病，严重影响患者的生活质量，且复发率高，目前尚缺乏特异性的有效手段，中西医结合治疗银屑病已成为皮肤病学界的共识。本项目在传统血分论治的基础上，认为其病机是在血热的基础上形成“风木(肝)失调，相火(心)内郁”的复杂证侯，形成了“凉血解毒重镇”的基本治则，长期临床验证了该治则的有效性、优效性及安全性，本项目以寻常型银屑病进行期患者为研究对象，以正常人为对照，结果显示，凉血解毒重镇法够降低寻常型银屑病血热证的PASI评分，改善银屑病的红斑、丘疹、鳞屑、皮损情况，具有广泛的临床适应性，可以满足于临床个体化诊疗需要；通过分析“凉血解毒重镇法”治疗前后Th1/Th2/Treg/Th17淋巴细胞亚群及相关细胞因子的变化，证实凉血解毒重镇法可以抑制淋巴细胞的活化、维持免疫稳态，有助于机体免疫功能恢复，其作用机制与抑制TH17细胞活化、提升Th2水平关系密切；利用生物芯片筛选出了Notch通路notch1，Jagged1，delta1，Hes-1的相关差异基因；通过Realtime PCR和Western-Blot从基因转录和蛋白表达水平上，验证了凉血解毒重镇法可以下调寻常型银屑病血热证患者外周血中Notch1、Delta1的水平。本项目结合临床皮损的改善情况，从形态学、细胞学、相关因子以及基因转录、蛋白表达等层面，较为系统的阐释了凉血解毒重镇法对寻常型银屑病进行期患者T淋巴细胞Notch通路的调控效应，探索了其微观作用机制，有助于丰富中医治疗效应及复杂证候学的科学内涵。