凉血活血复方联合阿维A对寻常型银屑病患者皮损及循环Th17细胞分化、增殖及其功能的影响

Th17细胞在银屑病的发病中起主导作用。抑制Th17细胞可不同程度地治疗银屑病。本项目小组在前期研究中发现，凉血活血方联合阿维A治疗银屑病效果优于单用中药或西药。联合治疗效果优于中西药单独治疗效果的原因是否是Th17细胞被进一步抑制的结果？本项目拟采用多色纳米荧光技术、多色流式细胞术及荧光定量PCR等方法，对凉血活血方联合阿维A或二者单独治疗前后，患者皮损及外周血Th17细胞的分化能力、增殖与活化水平及功能等方面分别进行检测，研究中西药联合或单独治疗前后，患者皮损及外周血Th17细胞的分化与增殖等指标的改变与疗效的关系，研究中西药联合或单独治疗时，Th17细胞分化与增殖等指标改变的差异；探讨中药或中西药联合治疗银屑病对Th17细胞的影响，有助于进一步理解银屑病的免疫发病机制，并为二者联合治疗银屑病的有效性提供更合理的解释，为临床治疗寻常型银屑病时合理选择用药提供科学依据。

研究背景：靶向Th17细胞通路的生物制剂治疗银屑病有较好疗效，但是不能控制其复发，长期治疗有感染与恶性肿瘤的风险。寻找高效低副作用的药物成为银屑病治疗的重点。中药复方治疗银屑病有效，但是其疗效机制未明，限制了其临床应用。.实验方法与研究内容：采用实时定量PCR、凝胶阻滞实验、流式细胞术、荧光免疫微球技术等，研究患者皮损及PBMC Th17细胞因子、RORC2及IL-23R的mRNA表达、RORC2的转录活性、Th17细胞增殖与活化及分化相关因子的水平，分析中药复方的疗效及安全性，对其治疗机制进行初步探讨。.研究结果：1) Th17细胞因子、RORC2和IL-23R的mRNA水平均较对照组明显升高；2)患者组CD38+HLA-DR+及Ki67+的Thl7细胞百分比均高于对照组；3）患者组皮损和PBMC RORC2的转录活性明显高于对照组(患者组平均灰度值分别为64.50±13.79和81.72±22.05，正常对照分别为22.54±5.16和25.58±15.48)；4）患者组IL-17A、IL-17F、IL-21和TNF-α的血清水平均高于对照组。上述结果均为计量资料，PCR结果分析采用△△Ct法，每项研究结果两组间比较均采用t检验，用SPSS17.0统计软件分析，上述各项研究两组差异均有统计学意义（P<0.05）。.研究结论及意义：Th17细胞可能通过分泌相应细胞因子参与银屑病血热证的发病；中药复方治疗银屑病血热证安全有效；其作用靶点可能是Th17细胞炎症通路。Th17细胞分化功能增强，增殖与活化及其细胞因子水平升高，可通过作用于效应细胞，引起细胞增殖及炎症，参与银屑病皮损的形成。中药复方治疗后患者皮损面积、PASI评分及生活质量评分均明显改善，表明其治疗银屑病有效；治疗后患者血尿常规、肝肾功等生化指标无明显异常，说明中药复方治疗无明显副作用，患者耐受性较好，可为临床治疗银屑病提供依据和参考。中药复方治疗后患者皮损改善的同时，RORC2转录活性及IL-17A等细胞因子和IL-23R、RORC2的表达均下调，提示中药复方可能通过阻抑Th17细胞炎症通路，减轻对角质形成细胞增殖及炎症的刺激，从而改善临床症状。