Ang II/HIF-1a通路在大鼠卵巢RAS系统生理功能中的作用及调控机制研究

Ovarian RAS system is directly involved in the regulation of ovarian physiological functions, especially the functional active component Ang II, which plays a very important role at different stages in the reproductive cycle as a paracrin/autocrine regulation factor. However, their signaling mechanisms as well as the precise biological functions remain to be further established. Fortunately, the recently discovered transcription factor HIF-1a will open a new chapter in this field of further detailed investigations by its functional study. Based on our previous RMIC experiments and HIF-1a silenced SD rat experiments, the present project will use chronic and acute experiments, ovarian perfusion and exogenous gene expression in vivo techniques to further study the molecular regulating mechanism of ovarian RAS physiological functions in detail through the reproductive hormone induced-immature rat ovarian follicle development model, with ovarian granulosa/luteal cells in vitro culture experiments performed to further conform the results of animal experiments, in order to establish "reproductive hormone/Ovarian RAS-HIF-1a-ovarian functions" this genetic regulatory pathway. Our research will provide new experimental data and theoretical basis for further understanding the regulating mechanism of ovarian physiology functions, and will reveal the clinical significance of manipulating ovarian RAS system, which will contribute to the prevention of ovarian diseases resulting from ovarian RAS system disorders, such as polycystic ovary syndrome (PCOS), ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS) and ovarian tumors.

卵巢RAS系统直接参与了卵巢生理功能的调节，尤其是其活性组分Ang II，作为旁分泌/自分泌调控因子具有非常重要的作用，但它们的信号转导机制以及精确的生物学功能还有待进一步建立。直到最近有关转录因子HIF-1a的发现及其功能的研究将为这个研究领域揭开新的篇章。本项目以我们前期RMIC细胞体外培养实验和沉默HIF-1a的SD大鼠实验为基础，通过生殖激素诱导未成熟大鼠卵巢卵泡发育模型，利用慢性和急性实验，以及卵巢灌注和外源基因体内表达等技术对卵巢RAS系统生理功能的分子调控机制进行深入研究，并通过卵巢颗粒/黄体细胞体外培养实验进一步的验证，旨在建立"生殖激素/RAS-HIF-1a-卵巢功能"这一遗传调控通路。本研究将为进一步理解卵巢功能的调控机制提供新的实验数据和理论基础，揭示操纵卵巢RAS系统的临床意义，有助于预防由卵巢RAS系统紊乱导致的疾病，如PCOS、OHSS和卵巢肿瘤等。

卵巢RAS系统直接参与了卵巢生理功能的调节，尤其是其活性组分Ang II，作为旁分泌/自分泌调控因子具有非常重要的作用，但它们的信号转导机制以及精确的生物学功能还有待进一步建立。直到最近有关转录因子HIF-1a的发现及其功能的研究将为这个研究领域揭开新的篇章。本项目严格按照研究计划进行，研究内容没有发生调整与变化。. 本项目的研究内容主要包括两个部分：动物实验和细胞实验。其中，动物实验主要指PMSG诱导的未成熟大鼠卵泡发育模型实验（实验I至实验VI）；细胞实验主要指卵巢颗粒细胞体外培养（实验VII）。通过本项目的研究，我们得到了三个方面的研究结果。. 首先，确定了HIF-1a在大鼠卵巢卵泡发育中的作用。实验I分析了PMSG诱导未成熟大鼠卵巢卵泡发育过程中Ang II、HIF-1a和PCNA的表达模式，表明了其与在卵巢卵泡发育过程有关；实验III通过注射HIF-1a拮抗剂进一步阐明了HIF-1a在卵巢卵泡发育中的重要的作用；除了药理学方法，实验IV利用分子生物学手段也证明了HIF-1a对卵巢卵泡的发育的调控作用。. 其次，确定了Ang II在大鼠卵巢卵泡发育中的作用。实验II通过Ang II拮抗剂研究发现Ang II在卵巢卵泡发育过程中同样具有非常重要的调控作用。实验V利用Ang II处理未成熟大鼠，结果发现Ang II与PMSG一样可以诱导卵巢卵泡的发育。实验VI利用分子生物学手段同时证明了Ang II的作用。. 最后，颗粒细胞体外培养实验（实验VII）一方面验证了上述动物实验的结果，另一方面揭示了Ang II与PMSG的作用机制的差异。. 综上所述，本项目通过未成熟大鼠卵巢卵泡发育模型，利用药理学方法与现代分子生物学手段，从动物实验与细胞实验这两个方面对卵巢RAS系统与卵巢卵泡发育之间的调控关系进行了深入研究，建立了"生殖激素/RAS-HIF-1a-卵泡发育"这一遗传调控通路。本研究将为进一步理解卵巢功能的调控机制提供新的实验数据和理论基础，揭示操纵卵巢RAS系统的临床意义，有助于预防由卵巢RAS系统紊乱导致的疾病，如PCOS、OHSS和卵巢肿瘤等。.