异体牙齿干细胞移植与机体B淋巴细胞相互影响的研究

牙齿干细胞被认为是牙齿及牙周组织再生的最佳种子细胞来源之一，自体牙齿干细胞的来源非常有限，如能异体应用，则能解决牙齿及牙周组织再生种子细胞来源的瓶颈问题。本课题组已完成牙齿相关干细胞的分离、培养、鉴定以及对机体细胞免疫(T淋巴细胞)的影响，研究发现牙齿相关干细胞有明显的T细胞抑制功能。机体的免疫可分为细胞免疫和体液免疫，本研究在已有工作基础上，进一步研究牙齿相关干细胞与机体体液免疫(B淋巴细胞)的相互作用，探讨牙齿相关干细胞对B淋巴细胞表型、增殖、分化、趋化、分泌功能的影响、同种异体移植后受体体液免疫应答的状况，观察B淋巴细胞对牙齿相关干细胞表型、克隆形成率、增殖力、多向分化能力、干细胞标志物表达、染色体核型以及体内形成组织能力等的影响。通过本研究可获得牙齿相关干细胞与机体体液免疫应答间的相互作用特点，为异体牙齿干细胞应用于牙齿和牙周组织再生提供进一步的理论和实验依据。

牙周膜干细胞被认为是牙齿及牙周组织再生的最佳种子细胞来源之一，自体牙周膜干细胞的来源非常有限，如能异体应用，则能解决牙齿及牙周组织再生种子细胞来源的瓶颈问题。本课题组已完成牙周膜干细胞的分离、培养、鉴定以及对机体细胞免疫(T淋巴细胞)的影响，研究发现牙周膜干细胞有明显的T细胞抑制功能。机体的免疫可分为细胞免疫和体液免疫，本研究在已有工作基础上，进一步研究牙周膜干细胞与机体体液免疫(B淋巴细胞)的相互作用，探讨牙周膜干细胞对B淋巴细胞表型、增殖、分化、趋化、分泌功能的影响、同种异体移植后受体体液免疫应答的状况以及相关分子学机制。研究结果发现，人牙周膜干细胞对B淋巴细胞免疫表型没有明显影响；人牙周膜干细胞能够剂量依赖性的抑制B淋巴细胞的增殖，且牙周膜干细胞对B淋巴细胞增殖的抑制不是通过诱导B淋巴细胞凋亡来实现的；牙周膜干细胞能够明显抑制B淋巴细胞的趋化因子受体CXCR4、CXCR5、CCR7的表达，明显抑制CXCR4、CXCR5、CCR7介导的B淋巴细胞趋化；牙周膜干细胞能够剂量依赖性的抑制B淋巴细胞向CD138+浆细胞分化，能够剂量依赖性的抑制IgG、IgA和IgM的产生；与B淋巴细胞共培养以后，牙周膜干细胞对PGE2, IL-2, IL-4, IL-8, IL-10, IL-12p70, TNFα, IFNγ和 TGFβ1的浓度没有影响，能够显著增加IL-6的浓度；B淋巴细胞能够促进牙周膜干细胞分泌IL-6，牙周膜干细胞通过IL-6来抑制B淋巴细胞的凋亡；在淋巴细胞+牙周膜干细胞+B淋巴细胞刺激因子共培养后，牙周膜干细胞的PD-1，PD-L1, PD-L2表达明显升高，通过阻断实验发现，加入抗PD-1抗体可以恢复90% 的B淋巴细胞增殖，且这种恢复增殖作用呈现剂量依赖性；动物实验发现，牙周膜干细胞异体移植有很好的牙周组织再生，且没有体液免疫排斥反应发生。通过本研究，获得牙周膜干细胞与机体体液免疫应答间的相互作用特点，为异体牙周膜干细胞应用于牙齿和牙周组织再生提供进一步的理论和实验依据。