干细胞移植诱导产生调节性T细胞在同种异体心脏移植中的作用

终末期心脏疾病患者心脏移植面临着免疫排斥反应这一最大的障碍。已经有报道骨髓源的间充质干细胞(MSCs)广泛用于减轻异基因排斥的移植前处理、促进移植物存活。用MSCs进行外周移植和胸腺修饰是否能够产生更好的特异性免疫耐受效果？目前尚无将MSCs行胸腺内注射结合外周移植后对同种异体移植物存活时间的影响和相关机制的探索。.本项目拟体外研究MSCs对淋巴细胞增殖的抑制，检测其对Treg的诱导和相关免疫抑制因子的分泌；通过建立同种异体心脏移植模型，对受体进行行胸腺内注射结合外周移植MSCs的处理，预期诱导一种更持久有效的嵌合和特异性的免疫耐受，同种异体供心存活时间有明显的延长，存活质量明显提高，分析免疫耐受相关的细胞和分子机制。本研究首次将MSCs胸腺内注射结合外周移植结合起来，探索其对免疫耐受的诱导及相关机制，此工作将会对同种异体移植现状带来一个新的突破，为将来临床医疗水平的提高提供理论依据。

目的：研究骨髓间充质干细胞在大鼠同种移植免疫反应中的作用，特别是对调节性T细胞水平的影响，并探讨可能机制。.方法：以氧化铁钠米颗粒标记大鼠骨髓间充质干细胞，分析检测干细胞标记对干细胞功能的影响。体外以供体骨髓间充质干细胞与受体T细胞进行混合淋巴细胞培养，检测培养对调节性Ｔ细胞及相关细胞因子水平影响。通过大鼠同种异体心脏移植模型，将标记后干细胞通过胸腺修饰、外周静脉注射等不同途径进行受体处理，检测干细胞在受体内分布。并检测心脏移植物存活时间，调节性Ｔ细胞水平等，评估骨髓间充质干细胞预处理受体对调节性Ｔ细胞的影响。.结果：氧化铁纳米颗粒可以良好有效地标记大鼠骨髓间充质干细胞，并对干细胞功能无明显影响。受体CD4+T细胞与供体MSCs共培养后，可明显提高CD4+CD25+ Treg的比例，且具有MSCs剂量相关性，IL-6，IL-10，TGF-β等水平亦同比上调。大鼠心脏移植模型中，骨髓间充质干细胞输注可在移植物周围淋巴组织沉积，并可呈良好嵌合。胸腺修饰和外周静脉输注供体骨髓间充质干细胞均可上调受体内调节性T细胞水平，延长同种心脏移植物存活时间。