miR-211对骨髓间充质干细胞迁移的调控作用及机制研究

骨髓间充质干细胞（MSCs）移植修复梗死心肌已成为研究的热点。MSCs迁移到受损组织是干细胞修复组织至关重要的第一步，但研究表明经血管移植时，迁移到损伤区域的MSCs极少。因此研究影响MSCs迁移的相关机制至关重要。我们的初步工作显示缺氧处理能增强MSCs的迁移能力，microRNA芯片检测显示与正常培养的MSCs相比，缺氧处理后的MSCs有4个miRNA表达下调，有miR-211 等15个miRNA表达上调，根据靶基因预测分析显示miR-211与细胞运动有较大的关系，且其他研究表明miR-211与肿瘤细胞的迁移能力有关，因此，我们推测miR-211在MSCs迁移过程中可能发挥重要作用，本研究拟通过体内外实验深入研究miR-211对MSCs迁移能力的调控作用及机制，从新的角度阐明干细胞迁移的机制，并可能为改善MSC移植修复梗死心肌的疗效提供新的思路。

骨髓间充质干细胞（MSCs）移植修复梗死心肌已成为研究的热点。MSCs迁移到受损组织是修复组织的至关重要的第一步，现有的研究表明经血管移植时，迁移到损伤区域的MSCs 极少。因此研究影响MSCs迁移的相关机制至关重要。目的：研究microRNA调节MSCs迁移能力的机制，寻求提高MSCs迁移能力的方法。方法：在体外，利用microRNA芯片比较缺氧和常氧条件下microRNA的表达差异，并用transwell 方法对MSCs转染miR-211mimic或shRNA 后的迁移能力进行研究。运用miRBase、TargetScan等在线软件预测miR-211的靶基因，并用双荧光素酶报告基因进行验证。在体内，通过将雄性MSCs静脉注射到雌性大鼠体内的方式，研究细胞在心梗后的迁移到梗死区数量，并采用心超评价心功能。结果：1）缺氧处理能增强 MSCs的迁移能力；2）microRNA芯片检测显示与常氧MSCs相比，缺氧处理后MSCs的miR-211、miR-223等15个miRNA表达上调，而根据microRNA靶基因预测软件分析显示miR-211与细胞运动有较大的关系，且其他研究表明miR-211与肿瘤细胞的迁移能力有关，因此，我们推测miR-211在MSCs迁移过程中起重要作用。3）Transwell实验证实miR-211能上调MSCs的迁移能力，且采用双荧光素酶报告基因确证stat5a是miR-211的靶基因。4）体内实验表明miR-211能提高MSCs迁移到心梗区域的能力，MSCs过表达miR-211后能显著改善心梗后心功能。5）用shRNA技术抑制stat5a后，低表达miR-211对MSC迁移能力的抑制作用被削弱，进一步证实miR-211是通过stat5a来起作用。结论：以上结果表明miR-211是调节MSC迁移的重要因素，其可能通过调节下游靶基因stat5a而发挥作用，从而修复梗死心肌。