miR-301a调控多囊卵巢综合征高雄激素形成的分子机制研究

miR-301a is one of miRNAs significantly attenuated in theca cells in patients with PCOS in our previous miRNA array finding. Preliminary data showed miR-301a knockdown significantly promotes androgen synthesis in rat preantral follicles in vitro. Further bioinformatics analysis and experiments indicated that DENND1A is a candidate target gene of miR-301a. DENND1A is one of the susceptibility genes of PCOS, expressed in theca cells at different stages of rat follicular development. Forced expression of DENND1A led to an increase in the expression of Cyp11a1，Cyp17a1as well as androgen secretion. Hence, we hypothesized that miR-301a induced follicular androgen secretion is mediated by DENND1A, which involved in the pathogenesis of hyperandrogenism in PCOS. Using a rat preantral follicle culture model coupled with adenoviral gene manipulation procedures, we will examine the function of miR-301a in androgen production and the possible involvement of DENND1A. The current study will elucidate the regulatory mechanism, which may provide a theoretical basis for the targets of the treatment and prevention of hyperandrogenism in PCOS.

miR-301a 是我们前期应用 miRNA 芯片技术筛选发现的、差异低表达于PCOS 高雄激素血症卵泡膜细胞、在PCOS 中功能未知的miRNA。前期发现：体外培养卵泡中沉默miR-301a能显著促进雄激素生成。进一步生物信息学分析及实验初步证实，可通过调控CYP11A1 和CYP17A1 促进雄激素合成的DENND1A 可能是是miR-301a调控的靶基因。DENND1A 是PCOS的易感基因之一，表达增加能够促进卵泡膜细胞雄激素的生成。据此，我们提出“miR-301a 通过DENND1A 调控卵泡雄激素合成进而参与PCOS 高雄激素血症形成”的科学假说。本研究拟应用卵泡体外培养体系及重组腺病毒技术，以DENND1A为机制线索，系统评价miR-301a在卵泡雄激素合成中的功能和机制。本研究将有助于理解PCOS高雄激素血症形成机制，也为PCOS开拓新防治方法提供靶标。

多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）是一种最常见的妇科内分泌疾病，以雄激素过高、持续无排卵、卵巢多囊样改变为特征。PCOS发病机制至今尚未阐明，目前认为，高雄激素血症在PCOS的发病过程中起关键作用，现已证实PCOS增多的雄激素主要由卵巢卵泡膜细胞合成。因此，从卵巢卵泡膜细胞层面，探讨PCOS雄激素生成增多的机制，无疑可以为PCOS提供新的防治靶点。而进一步筛选PCOS相关miRNA，探讨miRNA在PCOS卵泡膜细胞雄激素合成中的作用与机制，已成为PCOS防治研究的新切入点。miR-301a我们利用芯片筛选获得的、差异低表达于PCOS高雄激素血症卵泡膜细胞的miRNA，目前其在PCOS高雄激素血症发生发展过程中的作用未知。本课题研究中我们发现在体外培养的大鼠卵泡中miR-301a通过Dennd1a调控卵泡膜细胞雄激素的合成，而Dennd1a在卵泡雄激素合成过程中发挥着重要的促进作用并且在PCOS卵泡膜细胞中高表达。本研究首次阐明miR-301a在卵巢中的生物学特性以及在卵泡雄激素生成过程中的作用，将为人们更好的理解PCOS高雄激素血症形成机制提供新的线索，并为遏制PCOS高雄激素的形成提供新的思路，因此也具有重要的临床研究价值。