脑MDCs选择性剪接的调控及其在神经发育中的功能研究

脑MDCs（Adam11、22和23）是Adam家族的一个亚类，主要在脑中表达，敲除Adam22、23的小鼠共济失调，出生后两周死亡，但国内外对脑MDCs及其多种剪切体无系统研究。本实验室的前期工作表明，Adam23不同剪接体的表达模式不同，可能参与了脑的发育；而维甲酸诱导P19细胞分化过程中的脑MDCs表达模式类似于脑发育过程。.本项目通过在P19细胞中基因转导、RNAi抑制、抗体阻断、多肽竞争等方法，研究诱导过程中MDCs及其不同剪接体对细胞形态、迁移能力、细胞联系的形成等方面的影响；采用RT-PCR、原位杂交、免疫组化等检测小鼠不同发育阶段MDCs表达模式；采用生物信息学方法分析Adam23差异剪接的顺式元件，通过体外转录及剪接，验证顺式元件的作用，并寻找反式元件及造成差异剪接的原因。上述工作将阐明MDCs在脑发育中的功能，明确脑MDCs选择性剪接的机制及意义，加深对脑发育的认识。