长链非编码RNA调控调节性T细胞发育与功能的机理研究

Regulatory T cells are essential in maintaining immune balance and self-tolerance. It is reported that lncRNAs regulate the differentiation of Th1，Th2 and Th17 cells. The expression profiles of lncRNAs in Treg cells are specific. We indicate that Usp21 stabilizes the function of Treg cells via acting as a deubiquitinase of GATA3. Med23 is one of the co-expression genes of Usp21 which is important for the activation of Teff cells. Knock out of Usp21 in Treg cells disturbers Th1 cell induced inflammation in mice. The percentage of Med23-/- Treg cells is much lower in the adipose tissue. The development of Treg cells is normal in these two types of knockout mice. The RNA-seq data indicate that there are 87 lncRNAs down regulated and 221 lncRNAs up regulated in Usp21-/- Treg cells. While in the Med23-/- Treg cells, 51 lncRNAs are down regulated and 42 lncRNAs are up regulated. And more than one hundred lncRNAS are high expressed in both knockout and normal Treg cells. On the basis of our previous study, we will further analysis the mechanisms underlying how these deregulated lncRNAs regulate the phenotype of Treg cells in the knock out mice and how high expressed lncRNAs regulate the differentiation and function of Treg cells under inflammatory conditions. This study will lay a basis on the better understanding of regulatory network in Treg cells and provide new clues for the treatment of important human diseases.

调节性T细胞（Treg）对于维持机体免疫平衡和耐受至关重要。长链非编码RNA（lncRNA）参与T细胞激活、分化及调控，在Treg细胞中有特征性表达谱。我们发现在Treg特异性敲除Usp21小鼠中,Th1型免疫反应明显强于正常对照小鼠；而Treg特异性敲除Med23小鼠脂肪组织中Treg细胞比例显著降低；两种敲除小鼠中Treg细胞发育正常。高通量测序证实在Usp21-/- Treg、Med23-/- Treg中存在几十或几百个lncRNAs表达异常；也有上百个lncRNA在基因敲除和对照Treg细胞中均高表达。基于小鼠表型和lncRNA表达谱，本课题将重点研究这些这些特征性lncRNA在Treg抑制Th1型免疫反应，组织特异性Treg调控机制；以及共同高表达的lncRNA在炎症条件下对Treg分化及稳态的调控，从而为重大免疫相关疾病诊治提供新靶点和新线索。

调节性T细胞是维持机体免疫平衡不可或缺的一类免疫抑制细胞。FOXP3是调节性T细胞的关键转录因子，通过和不同的蛋白质结合成为转录复合体，转录激活或者抑制下游基因的表达。FOXP3对于Treg的功能至关重要，因而对于FOXP3转录复合体的深入研究具有重大的科学及社会价值。.目前对于转录复合体中的蛋白质已经有很多研究，然而lncRNA是否参与其中并不明确。我们使用RIP-seq技术分析了这一问题，并鉴定出在Treg细胞中与FOXP3结合的lncRNA。.耐药特别是耐多药肺结核的治疗极其困难，耐多药肺结核病人的治疗周期长，治愈率低。因此了解产生耐药的原因，并寻找新的治疗靶点对于这类疾病的治疗具有重大意义。为了分析初发的敏感性肺结核患者与耐多药肺结核患者免疫系统出现的差异，我们进行了以下研究。.我们按照年龄及性别匹配原则，分别收集敏感性和耐多药肺结核患者的外周血，通过转录组测序分析其中差异表达的miRNA及circRNA。然后分析了其中差异最明显的circRNA参与的调控网络，结果提示我们，耐多药结核患者体内的巨噬细胞的吞噬功能以及炎症小体功能可能受到了抑制。.综上所述，课题对于调节性T细胞（Treg）特异的lncRNA进行了深入的分析，发现并确定了若干新的调控FOXP3及Treg的lncRNA；对于肺结核患者外周PBMC中差异表达的非编码RNA进行了初步的分析，研究成果为疾病的诊断和治疗提供了有利的研究基础。此外，我们对于肿瘤细胞调控Treg细胞的功能也进行了研究。我们的研究证实三阴性乳腺癌细胞分泌的ANXA1可以增强Treg的免疫抑制功能，从而导致免疫耐受环境的形成。而ANXA1受体的抑制剂，可以激活抗肿瘤免疫。