初级感觉神经元-卫星胶质细胞间交叉兴奋在炎症性内脏痛及痛敏中的作用

炎症性内脏痛及痛敏是目前临床上普遍存在的问题，其发生机制尚未完全阐明。内脏感觉传入信号的调控机制是目前的研究热点，而对于神经元-卫星胶质细胞间的交叉兴奋在内脏感觉中作用机制还知之甚少。我们前期的研究结果显示DRG神经元钙通道显著上调，且在炎症性内脏痛及痛敏中起了非常重要的作用，同时还发现模型鼠DRG P2X7R、TNFα的表达上调。研究显示P2X7主要表达在卫星胶质细胞上，同时神经元与卫星胶质细胞间存在解剖及功能上的密切关联。本项目拟采用sniffer patch clamp、胞内钙及其他细胞分子生物学方法，研究神经元-卫星胶质细胞间的交叉兴奋环路（神经元上调的钙通道-胶质细胞的上调P2X7R-TNFα旁分泌增加）在炎症性内脏痛及痛敏中的作用。通过以上研究，旨在阐明神经-胶质间正反馈环路在炎症性内脏痛及痛敏中的作用，从而为炎症性内脏痛及痛敏的临床治疗提供新的方向及靶点。

内脏痛觉在胃肠道疾病如炎症性肠病中是非常常见的症状。而潜在的分子生物学机制并不清楚。今年来的研究发现背根神经节（DRG）中神经元与胶质细胞间的交互兴奋在内脏痛觉高敏感的产生具有非常重要的作用。胶质细胞的兴奋、离子通道、促炎因子的释放共同促成了这种交互兴奋。我们的研究意在研究由TNBS诱导的炎症性肠病大鼠内脏高敏感中肿瘤坏死因子α (TNFα)、钙离子通道、卫星胶质细胞的作用及相互作用。我们应用芯片技术发现了TNBS大鼠中172个基因发生了肿大的变化。钙通道、TNFα的改变显著。在进一步的研究中我们发现TNBS诱导的大鼠DRG中TNFα、钙通道Cav1.2、Cav2.3的表达上调，并且TNFα主要表达在卫星胶质细胞中。通过电子显微镜管擦发现这些胶质细胞发生了代表活化的特征性的改变。经过电刺激我们发现TNBS组大鼠DRG中TNFα释放增加。并且应用膜片钳技术发现TNFα可以活化DRG中的神经元使其放电增加。从而我们推测卫星胶质细胞中高表达的TNFα在外周信号传入的作用下释放出来，作用于周围的神经元、激活神经元，使信号在DRG中传递、放大，在外周水平产生内脏那个高敏感。经过对急性分离TNBS组、对照组两组大鼠的神经元发现TNBS组神经元的活性增加、特异性阻断钙通道和TNFα后神经元的兴奋性下降。经过鞘内给药拮抗TNFα和钙通道TNBS大鼠的痛觉高敏感减弱，从整体的水平证实了我们的结论。目前项目基本完成。