胡黄连苷Ⅱ治疗缺血性脑卒中最佳剂量和时间窗及机制的研究

缺血性脑卒中是严重危害人类健康的疾病，目前尚缺少有效的治疗方法。申请者前期研究工作表明，胡黄连苷Ⅱ对脑缺血损伤具有较好的治疗作用。本研究将在原有工作基础上，首先制备大鼠动脉粥样硬化性局灶性脑缺血/再灌注模型，根据正交试验设计原理，应用胡黄连苷Ⅱ干预治疗，通过神经行为学，局部脑血流量，脑梗死体积，脑组织AQP4、NSE、S100和MBP的含量，脑细胞和血脑屏障的超微结构及细胞凋亡，综合评价胡黄连苷Ⅱ对缺血性脑卒中的治疗作用及其最佳剂量和时间窗。以抗NSE、GFAP和ED1抗体分别标记神经细胞、星型胶质细胞和小胶质/巨噬细胞，免疫荧光双标和LSCM检测TLR4、NFκB、TNFα在各种细胞的表达定位，实时定量PCR、Western blot研究TLR4、NFκB和TNFα基因和蛋白的表达规律。探索胡黄连苷Ⅱ抑制脑缺血损伤后炎症反应的作用机制，为研究开发防治缺血性脑卒中新药奠定理论基础。