类风湿关节炎脑损害的结构和功能磁共振及分子机制研究

The brain damage caused by rheumatoid arthritis has gradually got the attention of scholars, which characterized by cognitive dysfunction,the literature suggests that the morbidity of cognitive dysfunction in rheumatoid arthritis patients is 31%, with research significance, but so far the pathogenesis is not clear. This project intends to explore characteristics of brain damage in rheumatoid arthritis by the magnetic resonance imaging and functional magnetic resonance, and use comparative proteomics and mass spectrometry methods to analysis the differences in proteins between cerebrospinal fluid of rheumatoid arthritis patients with magnetic resonance abnormalities and the control group, then verify the differentially expressed proteins by Western blot. Mice will be immunized by the most significant difference in protein to make antibodies to the antigen, and test the antibody titer in cerebrospinal fluid and serum of rheumatoid arthritis patients by enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）. In animal experiments, the antibodies will be injected CIA mice, lupus mice and SPF mice, then compare the differences in brain damage of three groups of mice through behavioral tests, brain tissue pathology, immunohistochemistry and other methods, illuminate the role and mechanism of specificity autoantibodies in brain damage of rheumatoid arthritis.

类风湿关节炎引发的脑损害逐渐得到学者的重视，其主要表现为以认知功能障碍为特征的弥漫性脑损害，文献提示类风湿关节炎患者出现认知功能障碍的比例是31%，具有重要的研究意义，但目前为止发病机制尚不清楚。本课题拟利用磁共振及功能磁共振探讨类风湿关节炎的脑损害特点，利用比较蛋白组学及质谱方法分析磁共振异常的类风湿关节炎患者与对照组脑脊液中的差异蛋白，利用Western blot验证差异蛋白。将最显著的差异蛋白免疫小鼠，制备该抗原的抗体，利用ELISA方法检测类风湿关节炎患者脑脊液和血清中的抗体效价。动物实验中，将该抗体分别注入CIA小鼠、狼疮鼠和SPF小鼠体内，通过行为学测试、脑组织病理、免疫组化等方法，比较三组小鼠出现脑损害的差异，阐明特异性自身抗体在类风湿关节炎脑损害中的作用及机制。

项目背景：类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis,RA）引发的脑损害逐渐得到学者的重视，其主要表现为以认知功能障碍为特征的弥漫性脑损害，流行病学显示，RA患者出现轻度认知功能障碍的频率为20%-61%不等，高于由正常机体老化导致的认知功能障碍的发病率，目前临床上多用量表进行认知功能的评估，实验室及影像学检查尚处于探索阶段，具有重要的研究意义。.主要研究内容：采集受试者临床数据，评估RA患者的认知功能、焦虑、抑郁、日常活动能力，比较RA患者与正常受试者间认知功能、焦虑抑郁的差异及其与RA病情活动度间的关系；采集受试者静息态功能磁共振(rs—fMRI)数据，应用低频振幅(AI FF)方法分析比较受试者大脑自发活动的差异，分析受试者间大脑皮层厚度及表面积的差异，筛选RA患者与健康受试者间的差异表达蛋白。.重要结果及关键数据：1、我们发现难以自我护理的RA患者容易出现中度重度抑郁症和广泛性焦虑症（GAD），睡眠质量差和认知障碍 （P <0.05）。而且，高度疾病活动的RA患者的焦虑抑郁状态显着高于中疾病活动度的RA患者（P <0.05）。高活动度的RA患者睡眠质量差（P = 0.007）。在MoCA试验中，RA患者认知功能障碍主要表现再注意力和方向感方面（P <0.05）。 2、RA 患者静息态下神经活动存在异常，增高区可能反映与疾病相关的运动决策功能改变，功能降低区可能反映视觉功能改变。3、RA组的左侧额下回岛盖、额上回、额中回下部，右侧中央前回、海马旁回、皮层厚度明显的减低（P<0.05）；右侧中央后回皮层表面积明显减低（P<0.05）。海马旁回皮层厚度与延迟回忆功能评分，右侧中央前回皮层厚度与MoCA总分及语言、视空间执行功能相关有统计学意义（P<0.05）。 4、2D-LC-MSMS联合TMT技术筛选出认知障碍的RA患者相比较于认知正常的RA患者及健康受试者间有14个差异表达蛋白，ELISA验证出SHH在认知障碍的RA患者中的表达显上调，PON1在认知障碍的RA患者中的表达显下调。.科学意义：为诊断RA患者认知功能障碍提供影像学和血清学依据，为进一步研究RA认知功能损害的神经病理提供依据。